小鼠基因组睾丸泛素连接酶的挖掘与鉴定

《小鼠基因组睾丸泛素连接酶的挖掘与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、密级：中阉斜孥叠宪硒窥生略博士学位论文作者姓名：箧41叠指导教师：蓥壹生班究虽主国科堂瞳动物研窒压学位类别：堡堂埴±学科专业：筮直生物堂培养单位：生国抖堂院动物硒宜历2012年9月ByXiaojanHouADissertationSubmittedtoGraduateUniversityofChineseAcademyofSciencesInPartialFulfillmentoftheRequirementFortheDegreeofDoctorofDevelopmentalBiologyInstituteofZoology,ChineseAcademyofS

2、ciencesSeptember,2012致谢光阴似箭，岁月如梭。四年前踏入动物所的情景仿佛就在昨天。今天所有付出的辛苦和收获的喜悦最终都凝集在这近百页的论文里。此时此刻，我想对所有帮助过我的师长、同学、家人和朋友道一声感谢。首先我要感谢我的导师韩春生研究员。在这四年里我的每一步成长都离不来导师的指导和鼓励。在实验室工作起始，韩老师耐心地与我交流，根据我的科研背景选择课题；在课题停滞不前，我一筹莫展的时候，他及时帮助我分析原因，调整思路，鼓励我迎难而上：当我遇到挫折自暴自弃的时候，韩老师为我讲述他多年的人生感悟，让我清晰地自我定位，更加自信地走向下一个人生目标。

3、最让我感动和敬佩的是，在文章投稿阶段，韩老师经常修改文章到深夜。一句话、一个单词他都仔细推敲，甚至一两个标点符号错误，他也仔细更正。这些年导师对每个学生都是如此，不仅悉心指导我们的课题，而且注重培养我们的科研素养。所有的一点一滴我都看在眼里记在心里，这些都值得我在以后的工作·{-传承。感谢生殖生物学实验室各位领导和导师，他们全身心地投入工作，为大家提供了良好的科研氛围，都是我学习的榜样。在这几年里，室里很多导师给予我耐心的指导和珍贵的建议，使我受益良多。深深感谢刘以训院士和高飞研究员在每次l{i期考核和工作组会中给予的指导。特别是高飞老师，他多次在敲除小鼠囊胚注

4、射T作中给予我无私的帮助，使我能够顺利完成课题。非常感谢李卫研究员在泛素修饰系统建立过程中给予的指导，他的经验为我解决了很多困难。此外还要感谢中国科学院遗传与系统发育研究所李巍研究员，他慷慨赠送Sdy小鼠为我提供宝贵的实验材料。四年的集体生活中，很多老师和同学不仪是我学习和工作中的伙伴，更是我生活中的知心朋友。感谢廖尚英、林曦文、王敏、王秀霞、刘卫晓和崔秀宏老师在干细胞培养、囊胚敲除工作、体外泛素系统、数据分析以及日常工作给予的指导和协助。感谢本组甘海云、张伟、冯雪、李阳芳、吴Z,N、王思、肖振宇、王国军、马婷婷、张道琴等同学对我丁作的支持与协助。与你们朝夕相处

5、、共同奋斗的日子是我人生中宝贵的回忆。我们不仅是同学、同事，更是团队中的好伙伴。我们都为了共同的目标而努力，在彼此的关怀和鼓励中成长。此外我要特别感谢闰龙和万海峰同学。当我在T作中遇到突发困难时，他们慷慨地伸出援助之手帮我顺利完成实验。我的课题能够顺利完成离不开公共仪器平台各位老师的辛勤工作。在此我要特别感谢李世文、秦华和刘晓秋老师为我提供的帮助。此外我还要感谢研究生处和教育处的侯晓霞、杨培燕、刘晓明和张丽英老师。感谢他们在论文提交和答辩准备工作中提供的帮助和指导。十分感谢我的父母和爱人。没有父母的养育教导之恩，就没有今天的我。我的每一步成长都离不开你们对我的关

6、怀和爱护。虽然在科研的道路上我还没有取得巨大成就，但我热爱生活、坚持梦想，努力实现自身的社会价值。在我面对巨大压力、没有信心的时候，我的爱人给予充分理解并积极配合我的工作，让我感受到家庭的温暖。我内心深处非常感激家人的支持，因为你们的爱是我最大的财富。在未来的工作岗位上我会更加努力拼搏，在未来的生活中我会承担起更多责任，用自己的实际行动回报你们的付出!摘要泛素化途径需要泛素激活酶、结合酶和连接酶共同完成，底物蛋白质的特异识别主要由泛素连接酶(E3)完成。哺乳动物精子发生过程中存在人量的泛素化修饰以及其介导的降解，同时小鼠和人类基因组有大量E3编码基因。虽然小鼠和

7、人的E3被陆续发现，然而系统分析精子发生相关E3的工作尚未见报道。本研究丰要通过mRNA表达芯片和UniGene数据库来预测小鼠和人基因组泛素连接酶数量并分析小鼠睾丸组织中E3的表达概况。基于预测结果，我们对部分E3的mRNA表达特异性，亚细胞定位和连接酶活性进行验证，并对一些感兴趣基因深入功能研究。我们从小鼠摹因组中挖掘至1J398个E3编码基因，他们的产物含有经典的E3结构域RING，U．box$1]HECT。与人类基因组相比，E3编码基因在两物种问高度保守。我们发现有一群预测泛素连接酶显著富集于睾丸组织，这些酶在肝脏、肺脏和肌肉组织中含量很低或不表达。在7

8、3个富集蛋白中有32个在