转化生长因子β1在表面处理钛合金种植体骨界面表达变化的实验研究

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1、中国医科大学硕士学位论文转化生长因子-β1在表面处理钛合金种植体骨界面表达变化的实验研究姓名：宋明宇申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：李振春20030401中文摘要目的、通过检测转化生长因子一8l(TGF—B1)在种植体骨界面骨组织中的裘这，毙较裘面氧纯处理Ti6A14V、Ti6A14V纛316L含金的骨整含状况，评价表面氧化处理Ti6A14V的生物相容性。?方法i实验的材料为316L合金，Ti6A14V，表面氧化处理的Ti6A14V(蕊穗处理钛)，直径3nun，厚lmzn，裘嚣的氧化膜厚度势5pzn。术前均用丙酮去油，酒精清洗，超声清洗，高压蒸汽消毒灭菌。大鼠隧枧分3

2、组，每组30只，雌雄各半。术前用戊怨毙妥钠(40mg／kg)羧茬内注射全麻，术区瘸2％零j多卡因注蓑。暴露下颔骨外斜线上方，磨牙下方骨区。低速电钻配备直径3nun的钨钢直车针制备点径3nan，深略大于lnan的种植窝，制备过程中，大量生理盐零冲洗降温。以熬辩镊错爽会金莲其靛健，不犀金瀵捷震不同的塑料镊子。严密缝合肌层，皮肤。术后腹腔注射2万单位青霉素lml，标记。分别予术后1、2、3、4、6周断头处死动物，将含种禳落的曹块量予4％多聚乎醛露定。标本以8％EDTA脱钙，常规滔精脱水，石蜡包堙，切片。HE染色组：切片常规脱蜡至水，苏木素10分钟，水洗一次，盐骏溪耱分化30秒，水洗反蓝3

3、0分钟，伊红染色3分镑，脱水，95％酒精3分钟，100％酒j}

4、孽l、狂各lO分锋，二擎苯I、Ⅱ各lO分，树胶封片。'I'GF—Bl免疫组化染色组：切片常规脱腊至水，蒸馏水新鲜配制3％双氧水，室温10分钟灭活内源性酶，蒸馏水洗3次。热修复抗原(切片浸入0．01M枸橼酸盐缓冲液，PH6．0，电炉加热至沸腾后断电，间隔5—10分钟，反复2次，冷却后用PBS洗2次)。加正常山羊血清封闭液，室温40分钟，甩去多余液不洗。滴加一抗37℃一小时左右，一抗为1：200，4。C过夜，PBS洗2分钟3次。滴加试剂SABC，37℃30分钟，PBS洗5分钟，4次。DAB显色，5分钟，蒸馏水洗。苏木素轻度

5、复染，脱水，透明，封片。采集TGF—B1的图像，输入微机，进行图像分析。数据统计学分析。结果肉跟观察组织块，可见随时间推移，种植体与骨组织结合紧密，表面从无组织覆盖，到覆盖半透明骨膜样薄膜，再发展为表面骨组织覆盖，处理钛到第6周时，骨组织将金属完全包埋，好于Ti6A14V组和316L合金组。在H．E光镜下观察可见处理钛组和Ti6A14V组随时间推移，骨界面从疏松组织包绕至成骨细胞活跃，类骨质样组织逐渐增多，骨陷窝大而多，血管丰富，骨基质逐渐致密，骨小梁连结增多。处理钛组略好于Ti6A14V组，而316L合金组主要为纤维组织包绕，类骨质出现晚，量少，甚至第6周时部分种植体周围完全为纤

6、维组织，即使存在骨组织，细胞排列也不规则。免疫组化的结果观察到，成骨细胞、血管内皮细胞、类骨细胞的未分化间充质细胞、骨细胞的胞浆和部分骨基质呈阳性反应。统计学数据显示第2周3种金属的染色强度(平均灰度值)均达到高峰，之后逐渐下降，雌雄大鼠之间的染色强度差异无统计学意义(P>0．05)，从第1到第6周，处理钛组及Ti6A14V组分别同316L合金组相比，差异显著(P<0．05)。而处理钛组同Ti6A14V·2·组耀魄，仅在第2、3属夔异显著(O．010。05)。)声一“一+，√结论、蠢垂篡焦丝垄的Ti6A14V静檀体熬生物粳容性挽糌，优

7、予Ti6A14V秘316L台金，有袋好豹峪寒应罴翦途。’关键溯：种檀体；转纯生长因子一叠l；免疫缀纯÷；、l，!、∥?⋯：⋯＼j巷、∥露参?，’，liP一、、，j{?《27i■§，、：·3·TheExperimentalResearchofTransformingGrowthFactor—BlExpressionintheImplant—-BoneInterfaceofSurfaceOxidizedTitani··unlAlloyImplantsTodetecttheexpressionoftransforminggrowthfactor—B1(TGF一81)intheimplan

8、t—boneinterface，toobservetheosseointegrationof316Lalloy、Ti6A14VandsurfaceoxidizedTi6A14V，andtoevaluatethebiocompatibilityofsurfaceoxidizedTi6A14V．316La110y、Ti6A14VandsurfaceoxidizedTi6A14Vimplantwhosedianaeteris3mm，thicknessislmm．Thesur