Ⅰ型胶原在表面处理钛合金种植体骨界面表达变化的实验研究

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1、中国医科大学硕士学位论文Ⅰ型胶原在表面处理钛合金种植体骨界面表达变化的实验研究姓名：宋杰申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：李振春20030401审文摘要目的、÷f种植体与骨组织之间建立直接有序的结构功能连接，即骨整合(josseointegration)，是评价种植体成功的重要指标。骨整合理论表达了生物樱容性(biocompatibitity)的意义。钛及钛合金是因前应用最广泛、生物相容性最好的口腔种植材料，现认为其良好的生物相容性与表面氧化膜有关。天然形成的氧化膜较薄，现多采用各种表面氧化技术处理钛及钛合金弛植体，在表面形成机械氧化层。

2、I型胶原(type{collagen)是一种细胞外基质的有机组成成分，是主要的骨结构龌自。有研究表明，I型胶原不但为骨矿化提供基质，藤且可以促进成骨细胞进一步分化增殖，与成嚣细胞的附着翱伸展排列方向也有密切的关系。夕本实验中梅表蕊氧化层加厚的Ti6A14V合金种植材料棱入大鼠下颊骨中，通过对静擅体骨界嚣区的组织学研究秘I型胶原表达变化的免疫组化研究，寒评价这种材料用你口腔种植体的生物学性能。／／材料和方法、选用俸羹200—250克大鼠90只，雌雄各半，隧枧分成3组，每缱虑雌雄各半。2％戊巴比妥那(∞毫克／千克)腹黢内注赛寸全麻，在磨牙下方、外斜线上方

3、的骨面用低速手机剡备壹经3mm、深l。2mm的种孝妻窝，大量无菌生理盐水持续、肆洗降温。攮人3秘合金：316L不锈钢合金，Ti6赵4V合金，处理钛合金(用粥极氧化法在表面形藏5txmTiO：钝纯膜的合金材料)，塑料镊压冀就位。本后第1，2，3，霹，6周分别断头处死动物。取材，4％多聚擘醛液西定一箍，8％EDTA液脱钙两周，常规石蜡包罂。傲7岬厚连续切片，迸行HE染色稀免疫组纯SABC法染色(兔抗大鼠多壳隆抗体)。显微照相系统Coolsnapfx拍照，Metamorph图象分析仪和图象分析软件在400倍镜下，对种植材料一骨界面区I型胶原阳性部位的透光强

4、度进行灰度值测定，每张切片随机选择4个视野，用平均灰度值表示染色强度。进行统计学分析。结果1．HE染色观察处理钛合金组：第1周：种植体周围被疏松结缔组织包绕，界面区可见梭型或立方状成骨细胞，有少量类骨样组织；第2周：界面骨样组织增多，突入髓腔内，相互不规则连接，可见骨陷窝较大，血管丰富；第3、4周：新生骨增多，骨基质致密，骨陷窝较前期小，成骨细胞排列在新生骨表面，核大深染；第6周：镜下新生骨进一步增多，骨小梁交织排列，骨陷窝小。无纤维组织，血管少。2．I型胶原免疫组化染色结果：种植体一骨界面区新生的骨基质、成骨细胞胞浆、未分化的间充质细胞胞浆都有I型

5、胶原的免疫组化染色呈阳性。植入第1周，界面区的纤维结缔组织染色呈弱阳性。第2、3周，免疫组化染色反应显著增强，阳性反应的高峰期表达在第21天。从第4周到第6周，染色强度下降，代表骨基质区的进入矿化期。3．统计学检验显示，雌雄大鼠之间的总体平均灰度值经t检验无统计学差异(P>0．05)，将雌雄当一种变量处理。各个时间段处理钛合金组和Ti6A14V组的平均灰度值高于316L组，处理钛合金组高于Ti6A14V组。各个时期3种材料平均灰度值的差异均有统计学意义(P<0．05)。Z，户”／结论：本实验采用大鼠下颌骨植入表面处理的Ti6A14V合金材料的·2·动

6、物模型，进行HE染色观察，用免疫组化法标记界面I型胶原，对种植体骨界面早期骨形成情况进行组织学观察。结果发现，I型胶原作为骨基质的主要有机成分，在成骨细胞的增殖期表达强烈，在骨基质的矿化期表达下降，可以作为研究早期骨形成状况的指标。表面氧化膜增厚为5／xm的处理钛合金材料，生物学特性优于Ti6A14V，可以在早期诱导成骨细胞分化增殖，更多更迅速的形成新生骨，有利于后期形成骨整合界面。316L不锈钢合金不适于做口腔种植体。关键词钛氧化膜；骨整合；I型胶原；生物相容性j·3·TheExpressionofTypeICollagenintheInterfa

7、cebetweentheTi6A14VAlloyDisposed、硝thSurfaceOxidationFilmandtheBone：aninVivoStudyObjectsdirectorderlyconnectionofstructureandfunctionbetweentheimplantsandthebone，whichiscalledosseointegration，isanim—ponantcriteriontoevalua}etheSuccessofthedentalimplant．Titaniumandtitaniumahoymos

8、twidelyappliesfordentalimplantmaterialspresently．Itisc