普通小麦多酚氧化酶活性的初步研究

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1、安徽农业大学硕士学位论文普通小麦多酚氧化酶活性的初步研究姓名：杨朝柱申请学位级别：硕士专业：作物遗传育种指导教师：马传喜2003.6.1中文摘要多酚氧化酶(PPO)是～类广泛存在于动植物和微生物中的结合Cu元紧的蛋白黼，催化酚类物质发生氧化还原反应生成黑色索(melanin)，其主要生理功能磊静还不很清楚，但由于其对产晶的外观晶质和营养价缓影响较大丽受到重视。小麦籽糖中也禽有PPO，其对小麦面粉及其面粉基食品在加工和储藏过程中色泽品质影响较大，受到了育秘界熟重视，以期从遗传的建度对冀避孝亍改良。通过对小麦PPO测定方法的探索及PPO在小焘植株体内分布的研究

2、，对200份普逶小麦是释及资源款PPO溪牲嚣测定_稳簿选，续果淡骤：l以邻苯二酚为底物，采用分光光度法在405nm波长测定全籽粒多酚氧化酶活性浸提液翁啜光德变化。扶反应辩始至《5rain辩溺段酶键爱应交捩，晶罩辛滴差异较大，隧后则逐渐下降：浸泡时间对全籽粒浸提法测定多酚氧化酶活性舆有显蔫影响。浸泡时间小于20hr，品种闯差异较小；澄泡时间超过30hr，酶液自身吸光值增加较多；因此，澄泡时间以25．30hr为宜。小麦多黔氧化酶与底物反应较适宜的滋度和pH分别为35“C和6,0左右。品种间比较分析PPO活性的适宜方法是：用20粒种子加5mL蒸馏水浸泡25hr左

3、右，取i拜澎浸提懿渡和2mL邻苯二酚(100rmM)手37℃水浍5rain，然瑟在比邑双中混台，405nm波长下测定反应5min的吸光值。PPO的活性表示为△Axl03／min]g(△A为平均每分镑蔽光菠靛墙翔篷)。2灌浆厢期小麦植株自上而下，PPO活性及其同工酶种类有下降的趋势，即剑叶>籽粒>穗颈>第2节>第3节>缀>第4节>颖蠢，幼嫩部位PPO活性离，籽粒中阕工酶种类最为丰富，共有9条谱带。由此可见，小麦PPO基因表达具有空间特异性，从PPO对小爨品质影响酶角度来看，不能用器官的PPO分析代替对小麦籽粒的分析。3对200份普通，!、麦品种瓷源的PPO活

4、性测定势分据表明：(1)不同多致氧化酶活性范阑的品种频次分布呈偏态性，峰值倾向低多酚氧化酶活性--便tJ．(2)种皮颜色和胚翼囊蟪与多酚氧纯黪溪洼寿关，红皮熊秘一敷大子爨疫瑟秘；(3)鑫皮羚曩窝半角矮，l、麦中，PPO活性低的品种较多：(4)我国大筒积种丰直的一些小麦品种在PPO活性上存在筏黢差异，逶遘臻逡翻蕉低多酚氧纯酶活後懿器_释资漂，将有利予改善萁瑟质水平；(5)初步筛选出了一批可供进一步研究PPO的遗传资源。关键词：普通小凌；多酚氧化酶活性；小麦植株；籽粒AbstractPolyphenoloxidase(PPO)isakindofprotease

5、connectingCuelements，whichwidelyexistsinanimal，plantandmicro·organizm．PPOcatalyzesphenoliccompoundstOconversiontOo—quinonesinpresenceofmolecularoxygen．Theo-quinonesreactwithaminesorthiolgroupstoproductmelanins，andaffectqualityofproducts．ThephysiologyfunctionofPPOisnotwellunclersto

6、od．ThereissomePPOinwheatgrain，itmainlyaffectsthewhitenessofflourandflourbaseproductsinprocessingand髓orageofwheat．ThedarkeningphenomnaofsuchproductsmayreduceconsumeracceptanceanddecreasequalityoftheproduactsAsaresult，muchmoreattentionshoudbepaidtoPPOinwheatqualityimprovement．Threee

7、xperimentsonthemethodofmeasuringpolyphenoloxidaseactivityrthedistributionofPPOindifferencetissuesororgansofwheatplants，andthevariationofPPOincommonwheatvarietieswereconducted．Thereroltsshowedasthefollows：1Researchonmethodsofmeasuringpolyphenoloxidaseactivityinwheatkemet：Usingcatec

8、holassubstrate，theabsorbancechang