玉米黄粉酶法制备高F值低聚肽的研究

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1、西南农业大学硕士学位论文玉米黄粉酶法制备高F值低聚肽的研究姓名：陈芳申请学位级别：硕士专业：农产品贮藏与加工指导教师：陈宗道;阚建全2003.5.1摘要高F馕低聚驳具有赢支低芳豹特殊氨基酸构成，能够作为脬瘸患者、裹l寸出瘸人和运动员静膳食补充发挥耋溪的生理功麓。玉米漫法淀粉厂静裁产秘燕米黄耪支链氮基酸含量高，非常适宜于高F德低聚肽的制铸。因此，本文以玉米黄粉为原料，研究了高F值低聚肽的酶法制备过程鞠技术路线。主要磅究内容包括玉米黄粉蛋白的分离和增溶、爱自酶戆途辑、酶簿条{擎饶纯及过程控涮、超滤及啜辩条俘豹礁寂，并萎簿酶煞产物逶行相对分子质量分布范围和F

2、值的分析搭定，拟定了质量标准。f主耍研究结果如下：1、确定了以玉米黄粉为原料酶法制备高F值低聚肽的基本工艺路线，其关键在于添米黄羚蛋是瓣颈楚理、纛米黄耱蛋鑫熬酶薅窝褰F蕊羝聚获熬分离。2、玉米黄粉的预处瑷对酶法制备高F值低聚肽怒必需的，工艺涉及三个方面：第一，黄粉的脱色。选择丙酮作溶剂，以浸提条件料液比l：3、300c漫提4h，重复3次操露霹基本涂去玉米黄色素。燕二，聪除淀粉。脱色荧耪与承l：l漩会90。C糕纯lh嚣鞋1．O％的旺一淀粉酶在pH5．S、600C反应凝碘试验不变簸。再加入2．O％糖化酶程pH4．8、450C酶解8h后得到蛋白质含量为83．

3、5％的玉米黄粉鞭白。第三，孤米黄粉蛋白的增溶。添如还原裁Na2S03、碱瞧条终蟊舞衰激度可在不同程度上提高玉米荧粉蛋自的溶瓣度。本试验选择翱入O．10％Na2S03作还原荆，pmO．0，90。C处理15rain的方法进孳予增溶可使玉米黄粉鬣自溶解度达剿14．24％，可溶性氮指数N$I达到12．70％．3、单懿水解在酶解产物组分相对分子质量分布范墨上无法达到预定要求，采用双薅求解法。2709碱往蛋鑫浆对玉米黄耪鬣自酶簿作溺嫒强，最佳泛笔参数是：底糖浓度5．O％，10．O％的酶用量，pHl0．m，450C，水解时间8h，其结果为DH达到了33．5％，产物中

4、肽的含璺为2．869／100mL，氨基态氮含量为102．94mg／100mL，产物组分中棚对分子蔟薰分毒蔻黧为：5,ooo沃t占21，5％，2，000"-,5，000蠢24．4％，200-2,000占51．9％，200以下仅占2．2％。利用木瓜骚白酶进行二次酶解，最佳工艺参数魁：2．O％的术瓜蛋白酶用量，pH7．0，600C，水解时间为4h，产物中肽的含爨为2．109／100mL，氨基态氮含量灸230。05mg／mL，产餐缀分穰对努子袋爨分毒蕊围免：5,000戳上占10。泓，2，000～5,000占16．6％，200～2，000占67．1％，200以下

5、占3．7％。4、高F值低聚肽的分离和脱苦研究表明：分离小分子肽方法选择截留相对分子质爨爻5,000豹貘超滤，多默秘蛋白庚拔除去，滚爨渡缀分孛相对分子质量分鸯莲臣茺5．Ooo以上占6．4％，2,000—5，000占12．2％，200-2，000占76．9％，200以下占4．5％，达到低聚肽含量要求。为提离F值，研究了以吸附剂脱除AAA的方法，选择粉束状活性碳作蔽酣裁，最佳工艺参数是：辩液跑l：3，pH3．0，20。C，吸辩时闻为3h，产物含氮囊为2．7∥L，F值为22．59，产物组分中相对分子质凝分布范围为：5,000以下的肽占94．6％，2,000以下

6、的低聚获占70．5％，符合商F值低聚肢豹殛爨要求。由本磷究确立的酶法割备高F德低聚肽混合物工艺所获得的赢F值低聚肽M。为1,790，M。为920，褥率以玉米黄粉凝自计为34．1％。5、根据初步研究，制定了以玉米鬻粉为原料双酶法制各商F值低粱肽混食物的质蘑标准，分剐从感官指}最，理化指标和微生物指标三个方面规范产品戚璧，可作为生产中的质鼹控制参考。／o活性肽的酶法制备是生物技术蛋自质工程和酶工耩的重要内容。本研究所制得的商F值低聚默混食物，低聚肽含纛商，攘对分子瀵量小，熊够俘为特殊生理、病瑷及运动状态下A群的膳食营养供给。f制备工艺番步骤的工艺参数和质鬣

7、管理指标都已缀基本确定，鸯必要进～步中试、生产耪推广应用。X(本论文共诗鹜21个，表15个。)关键裁：玉米荧粉蔫F毒篁八诋聚默薅王裁StudiesOilPreparationofHighFischerRatioOligopeptidesbyEnzymeMethodsfromCornGlutenMeal(CGM)ChenFangCollegeofFoodScienceSouthwestAgriculturalUniversity,ChongqingChina,400716AbstraetHighFischerratiooligopeptideswitha

8、specialaminoacidscompositionofhighbranchedchain