S100蛋白与CathepsinD在先天性巨结肠诊断中的应用

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1、S-100蛋白与CathepsinD在先天性巨结肠诊断中的应用　作者：陈卫坚，周小渔，李梨平，贺新玉，范丽明【摘要】目的观察S-100蛋白（S-100）和组织蛋白酶D（cathepsinD，CAD）在先天性巨结肠（Hirschsprung’sdisease，HD）中的表达。方法应用免疫组织化学染色观察25例HD患儿及10例对照组儿童结肠。结果（1）在正常对照组与HD扩张段组肠壁肌间和黏膜下层可见CAD只对神经丛中神经节细胞阳性表达，对神经纤维与神经胶质细胞均不表达。S-100染色与CAD染色相反，神经纤维与神经胶质细胞均阳性表

2、达，神经节细胞阴性表达，表现为阳性神经丛中细胞状“空白区”。（2）在HD狭窄段组肠壁神经丛中缺乏CAD阳性表达。S-100染色神经丛中细胞状“空白区”未观察到；S-100强阳性表达的神经纤维束显著增生，扭曲呈波浪状。结论S-100和CAD的免疫组化染色对诊断HD具有重要意义。【关键词】先天性巨结肠组织蛋白酶DS-100蛋白ApplicationofS-100proteinandcathepsinDindiagnosisofHirschsprung’sdisease　　　　【Abstract】ObjectiveToobserve

3、theexpressionof10S-100protein(S-100)andcathepsinD(CAD)inthecolonofpatientswithHirschsprung’sdisease(HD).MethodsColonsfrom25childrenwithHDand10controlswerestainedforS-100andCADbyimmunohistochemistry.Results(1)InthecontrolsandthedilatedintestinesegmentoftheHD，CAD-posi

4、tiveganglioniccellswereobservedinmyentericandsubmucosalplexus.S-100positivenervefibersandgliocytestainedwerenegativetoCAD.Theganglioniccells-likeblankareaintheplexusstainedwerenegativetoS-100.(2)InthestenoticsegmentofHD，neitherCAD-positiveneuronsnorcell-likeblankare

5、ainS-100stainedwerefoundintheplexus.S-100positivefiberswereproliferatedobviouslyandwave-likeintheirappearance.ConclusionTheexpressionofS-100andCADimmunohistochemistry-staininghasanimportantsignificancetotheconfirmeddiagnosisofHD.【Keywords】Hirschsprung’sdiseasecathep

6、sinDS-100protein先天性巨结肠（Hirschsprung’10sdisease，HD）是小儿外科常见的消化道畸形，主要病理改变是远端病变段肠管神经节细胞缺如。在HD的病理诊断中，有部分病例，尤其是新生儿病例，由于肠壁神经系统发育不完全，神经节细胞欠成熟，形态不典型，与神经丛中神经胶质细胞难以鉴别。而且多数患儿并发肠道感染，肠壁内有较多炎细胞浸润，使HE切片中神经节细胞难以辨认。这些原因均可造成HD不易明确诊断。本研究应用免疫组织化学（免疫组化）方法，观察正常肠壁、HD扩张段和HD狭窄段肠壁神经组织中S-100蛋白

7、（S-100）和组织蛋白酶D（cathepsinD，CAD）的表达结果，加以分析，以明确诊断HD。1资料与方法1.1一般资料回顾我院2002年6月～2004年6月临床拟诊断为HD的手术切除标本25例。男22例，女3例，年龄1个月～4岁，其中≤3个月10例，>3个月15例，均经术后病理检查证实为HD，23例为常见型，2例为长段型。每例标本分别取近端扩张段切缘肠壁作为HD扩张段组，取远端狭窄段肠壁作为HD狭窄段组。10例横结肠或乙状结肠标本取自先天性无肛患儿造瘘术后切除的肠管，经光镜检查可见发育成熟的神经节细胞，作为正常对照

8、组。1.2检测原理CAD是一种天冬氨酸蛋白酶，属于溶酶体酸性蛋白酶家族。在人类脑组织神经元、体内神经节细胞中含量丰富，故可作为肠壁神经节细胞的标记。S-100是神经胶质细胞特异性蛋白，亦可存在于神经纤维中，可作为肠道神经丛中胶质细胞和神经纤维的标记。101.3方法标本经10%