基于GCMS的样品前处理及血清血浆对比研究

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1、中图分类号UDC0657540硕士学位论文学校代码密级10533基于GC．MS的样品前处理及血清／血浆对比研究StudyofSamplePreparationMethodandComparisonofserumversusPlasmabasedonGasChromatography--MassSpectrometry作者姓名：蔡品品学科专业：化学研究方向：分析化学学院(系、所)：化学化工学院指导教师：卢红梅教授论文答辩日期丝!至：岁．砂答辩委员会主席中南大学2013年5月原创性声明Illlllllllllillll

2、llllllM(1llllllIY2423065本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：整量仝堡2眺巫年』啤日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论

3、文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务j飙旦旺月雩日基于GC—MS的样品前处理及血清／血浆对比研究摘要：采用气相色谱．质谱联用技术(GC．MS)，对代谢组学研究中血清样本的前处理方法、血清样本在制备和分析过程中的稳定性以及血清血浆中内源性代谢物的异同进行考察。其中，血清样本的前处理方法主要研究蛋白去除和衍生化两个步骤，血清样本的稳定性主要考察样本在解冻

4、时、氮吹干后及衍生完后的存储温度和时间对代谢物分析的影响。对质控(qualitycontrol，QC)样本和血清血浆样本的图谱进行相对峰面积的相对标准偏差(relativestandardderivation，RSD)计算，全谱主成分分析(principalcomponentsanalysis，PCA)，信息量计算以及代谢物的定性定量分析。结论如下：(1)数据可靠性分析结果表明，仪器稳定性良好，这些前处理方法重复性及可靠性良好，适用于代谢组学研究。(2)不同前处理方法所得代谢图谱的PCA分析结果和信息量计算结果均表

5、明，不同衍生化试剂对代谢物谱带来的影响大于除蛋白试剂带来的影响。(3)血清样本稳定性实验结果表明，①样本在以下条件下能保持稳定：在4℃或25℃处解冻O．5．24h，氮吹干后在4℃处存放O．48h，或在25℃处存放O．24h，衍生完后不经历冷冻．融解循环在4℃处存放O．48h，或在25℃处存放O一10h；②样本衍生完后，若在进样之前经历了两次冷冻．融解循环，其中代谢物就发生了变化。(4)血清血浆中代谢物对比研究结果表明，血清和血浆中的共有代谢物有38种，除此之外，血浆中还包含另2种代谢物，这些共有代谢物中有11种在血

6、清血浆中含量存在差异。图15幅，表7个，参考文献71篇。关键词：代谢组学；气相色谱一质谱联用技术；前处理；血清；血浆；对比研究分类号：0657StudyofSamplePreparationMethodandComparisonofserumversusPlasmabasedonGasChromatography—MassSpectrometryAbstract：Theeffectsofdifferentdeproteinizationandderivatizationmethods，differentstorag

7、etemperatureandtimeinserumsampleprepatationonmetabolomewerecomparedbygaschromatography—massspectrometry．Thedifferencebetweenserumandplasmametabolomewerealsoassessed．Therelativestandardderivation(RSD)ofpeakareaandinformationcontentofprofilewerecalculated．Thepri

8、ncipalcomponentsanalysis(PCa)，qualitativeandquantitativeanalysisofserum／plasmasamplesandqualitycontrolsamples(QC)weredone．Theconclutionsareasfollows：1、)thereproducibilityresultdemo