胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1在活化肝星状细胞中的表达及意义

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1、胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1在活化肝星状细胞中的表达及意义作者：刘立新张骞骞郭晓红赵嘉慧韩德五【摘要】目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulinlikegrowthfactorbindingproteinrelatedprotein1，IGFBPrP1)在转化生长因子β1(tronstorminggrowthfactorβ1,TGFβ1)诱导的肝星状细胞中表达的变化及抗IGFBPrP1抗体对TGFβ1诱导的肝星状细胞产生Ⅰ型胶原的影响。方法大鼠肝星状细胞株(HSCT6)体外培养，分别设空白对照组(加入等量PBS)、不同浓度的TGFβ1处

2、理组、不同浓度的抗IGFBPrP1抗体处理组，处理因素作用24h，采用免疫组织化学染色、Westernblot检测IGFBPrP1在HSCT6中的表达，ELISA检测Ⅰ型胶原的含量并进行IGFBPrP1与Ⅰ型胶原的相关性分析。结果TGFβ1各处理组IGFBPrP1的表达均较空白对照组显著增强。抗IGFBPrP1抗体可以拮抗TGFβ1诱导的HSCT6产生的过多Ⅰ型胶原。IGFBPrP1与Ⅰ型胶原呈正相关(r=0.833，P<0.01)。结论IGFBPrP1参与了肝纤维化的形成，且可能在肝纤维化的发生、发展中占有重要地位。【关键词】胰岛素样生长因子结

3、合蛋白相关蛋白1；肝星状细胞；转化生长因子β1；Ⅰ型胶原11【Abstract】ObjectiveTostudytheexpressionofinsulinlikegrowthfactorbindingproteinrelatedprotein1(IGFBPrP1)inTGFβ1inducedhepaticstellatecellandtheeffectsofantiIGFBPrP1antibodyonthecollagenⅠproductionofTGFβ1inducedhepaticstellatecell.MethodsRathepaticstella

4、tecellline(HSCT6)wasculturedinvitro,andthenwasincubatedwithphosphatebufferedsolution(blankcontrolgroup),TGFβ1at2μg/Lor4μg/L(TGFβ1group),antiIGFBPrP1antibodyat0.1μg/L,1μg/Lor2μg/L(antiIGFBPrP1antibodygroup)orboth(TGFβ1+antiIGFBPrP1antibodygroup).Twentyfourhourslater,theexpressiono

5、fIGFBPrP1inHSCT6wasdetectedbyimmunohistochemicalstainingandwesternblotting;thecontentofcollagenⅠinculturesupernatantofHSCT6wasmeasuredbyELISA;therelationshipbetweenIGFBPrP1andcollagenⅠwasanalyzed.ResultsTheexpressionofIGFBPrP1inTGFβ1groupwassignificantlyhigherthanthatinblankcontrolg

6、roup.TheresultofELISAshowedthatantiIGFBPrP1antibodyantagonizedtheoverproductionofcollagenⅠbyTGFβ1inducedHSCT6.TherewasapositivecorrelationbetweenIGFBPrP1andcollagenⅠ(r=0.833,P<0.01).ConclusionsIGFBPrP1mayplayan11importantroleintheformationanddevelopmentofliverfibrosis.【Keywords】

7、IGFBPrP1;Hepaticstellatecell;TGFβ1;CollagenⅠ近年来对肝硬化的治疗仍未有突破性的进展，因此，推断肝硬化的发病机制中可能还有其他未知因素的参与［1］。胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulinlikegrowthfactorbindingproteinrelatedprotein1，IGFBPrP1)即IGFBP7(又名mac25)是一种具有生物活性的蛋白［2］。本实验旨在进一步明确IGFBPrP1在肝硬化、肝纤维化发生及发展中的作用，为临床寻找肝硬化、肝纤维化新的治疗靶点提供