香烟烟雾提取物对气道上皮细胞增殖和FIP200表达的影响

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1、香烟烟雾提取物对气道上皮细胞增殖和FIP200表达的影响【关键词】气道上皮细胞EffectofcigarettesmokeextractonproliferationandcycleofhumanairwayepithelialcellanditsFIP200expression　　【Abstract】AIM:Tostudytheeffectofcigarettesmokeextract（CSE）ontheproliferationandcycleofhumanairwayepithelialcellanditsmechanis

2、m.METHODS:AfterairwayepithelialcellsweretreatedwithCSE,theproliferationwasmeasuredwithMTTandthedistributionofdifferentcellcycleswasdetectedwithflowcytometry.FAKfamilyinteractingproteinofMr200000(FIP200)mRNAexpressionlevel,FAKfamilyinteractingproteinofMr200000（FIP200）

3、expressionlevelandtheassociationofFIP200withfocaladhesionkinase（FAK）wereanalyzedrespectivelybyreversetranscriptionpolymerasechainreaction（RTPCR）,Westernblotandimmunoprecipitation.RESULTS:CSEinhibitedtheproliferationofhumanairwayepithelialcellsandarrestedtheepithelial

4、cellsinG1phaseofcellcycle.ThenumberofepithelialcellsinSandG2phasedramaticallydecreased（P<0.01）.CSEincreasedthe10expressionlevelofFIP200mRNAandFIP200andtheassociationofFIP200withFAK（P<0.01）.TheeffectsofCSEonairwayepithelialcellswereallinadoseandtimedependentmann

5、er.TheexpressionofFIP200mRNAandFIP200andtheassociationofFIP200withFAKwerepositivelycorrelatedtotheincreasednumberofepithelialcellsinG1phase（P<0.01）andnegativelycorrelatedtotheproliferationandthenumberofepithelialcellsinSandG2phase（P<0.01）.CONCLUSION:CSEcaninhib

6、ittheproliferationofhumanepithelialcellsandtheincreasedexpressionofFIP200maybeoneofthefactorsresponsibleforit.　　【Keywords】CSE;airwayepithelialcell;cellproliferation;FIP200　　【摘要】目的：研究香烟烟雾提取物（CSE）对气道上皮细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制.方法：利用MTT法研究CSE对气道上皮细胞增殖的影响，采用流式细胞术分析气道上皮细胞细胞周期的影响

7、，以RTPCR和Westernblot检测气道上皮细胞FIP200mRNA和蛋白表达，以免疫共沉淀检测FIP200与局灶粘着斑激酶（FAK）连接状况.结果：10CSE干预的气道上皮细胞MTT吸光度比对照组明显降低，G1期细胞增多，S和G2期细胞明显减少（P<0.01），FIP200mRNA,FIP200的表达水平以及FIP200与FAK的连接均显著增高（P<0.01），且随CSE干预时间和CSE浓度而增大；气道上皮细胞FIP200表达水平和FIP200与FAK连接的增高均与G1期细胞增多呈正相关（P<0.01）

8、，与S和G2期细胞减少呈负相关（P<0.01）.结论：CSE显著抑制气道上皮细胞的增殖，FIP200的高表达可能是其作用机制之一.　　【关键词】香烟烟雾提取物；气道上皮细胞；细胞增殖；FIP200　　0引言　　气道上皮是呼吸器官对抗有害刺激的第一道防线，上