香烟烟雾提取物对气道上皮细胞增殖和fip表达的影响

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1、香烟烟雾提取物对气道上皮细胞增殖和FIP200表达的影响【关键词】气道上皮细胞EffectofcigarettesmokeextractonproliferationandcycleofhumanairwayepithelialcellanditsFIP200expression【Abstract】AIM:Tostudytheeffectofcigarettesmokeextractontheproliferationandcycleofhumanairwayepithelialcellanditsmechanism.MET

2、HODS:AfterairwayepithelialcellsweretreatedwithCSE,theproliferationwasmeasuredwithMTTandthedistributionofdifferentcellcycleswasdetectedwithflowcytometry.FAKfamilyinteractingproteinofMr200000mRNAexpressionlevel,FAKfamilyinteractingproteinofMr200000expressionlevelandt

3、heassociationofFIP200withfocaladhesionkinasewereanalyzedrespectivelybyreversetranscriptionpolymerasechainreaction,Westernblotandimmunoprecipitation.RESULTS:CSEinhibitedtheproliferationofhumanairwayepithelialcellsand10/10arrestedtheepithelialcellsinG1phaseofcellcycl

4、e.ThenumberofepithelialcellsinSandG2phasedramaticallydecreased.CSEincreasedtheexpressionlevelofFIP200mRNAandFIP200andtheassociationofFIP200withFAK.TheeffectsofCSEonairwayepithelialcellswereallinadoseandtimedependentmanner.TheexpressionofFIP200mRNAandFIP200andtheass

5、ociationofFIP200withFAKwerepositivelycorrelatedtotheincreasednumberofepithelialcellsinG1phaseandnegativelycorrelatedtotheproliferationandthenumberofepithelialcellsinSandG2phase.CONCLUSION:CSEcaninhibittheproliferationofhumanepithelialcellsandtheincreasedexpressiono

6、fFIP200maybeoneofthefactorsresponsibleforit.【Keywords】CSE;airwayepithelialcell;cellproliferation;FIP200【摘要】目的：研究香烟烟雾提取物对气道上皮细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制.方法：利用MTT法研究CSE对气道上皮细胞增殖的影响，采用流式细胞术分析气道上皮细胞细胞周期的影响，以RTPCR和Western10/10blot检测气道上皮细胞FIP200mRNA和蛋白表达，以免疫共沉淀检测FIP200与局灶粘着斑激酶连接状

7、况.结果：CSE干预的气道上皮细胞MTT吸光度比对照组明显降低，G1期细胞增多，S和G2期细胞明显减少，FIP200mRNA,FIP200的表达水平以及FIP200与FAK的连接均显著增高，且随CSE干预时间和CSE浓度而增大；气道上皮细胞FIP200表达水平和FIP200与FAK连接的增高均与G1期细胞增多呈正相关，与S和G2期细胞减少呈负相关.结论：CSE显著抑制气道上皮细胞的增殖，FIP200的高表达可能是其作用机制之一.【关键词】香烟烟雾提取物；气道上皮细胞；细胞增殖；FIP200　0引言气道上皮是呼吸器官对抗有害刺

8、激的第一道防线，上皮受损后的及时修复是维持气道稳态的重要环节.支气管上皮细胞损伤脱落是哮喘和慢性阻塞性肺病等呼吸道疾病的起始环节和病理基础，而气道疾病的缓解有赖于上皮完整性的修复与维持.其修复包括细胞向损伤部位迁移，细胞增殖和细胞细胞、细胞细胞外基质黏附等中心环节［1，2］.吸烟是呼吸道疾