银杏营养贮藏蛋白质的变化规律研究

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1、南京林业大学硕士学位论文银杏营养贮藏蛋白质的变化规律研究姓名：王改萍申请学位级别：硕士专业：森林培育学指导教师：彭方仁2003.5.1摘要利用单向电泳和双向电泳技术，研究了银杏雌雄株在2002年9月到次年3月的叶片及枝条内的营养贮藏蛋白质的组分，并采用考马斯亮蓝染色法测定了银杏叶片和枝条在不同季节中可溶性蛋白质含量。试验结果表明：1．无论银杏雌雄株，其叶片可溶性蛋白质含量均表现出明显的季节变化，即从9月中旬到10月下旬蛋白质含量增加，之后含量逐渐下降，到11月中旬叶片全部变黄即将脱落时含量降到最低值。雄株叶片内的蛋白质含量水平在不同季节内均高于雌株。2．银杏枝条的蛋白质含

2、景也存在明显的季节性变化，从秋季到冬季，蛋白质含量逐渐升高，反映出蛋白质在枝条内的积累；而从冬季到早春2月的这个阶段，蛋白质含量显著降低，反映此阶段蛋白质发生降解，为银杏萌芽提供氮素营养。但2月到3月之间表现为蛋白质含量升高，可能是银杏在3月时根系吸收功能恢复的结果。比较雌雄株在各个季节中蛋白质含量情况，也发现雄株枝条内的蛋白质含量高于雌株，可能是雄株的生长势优于雌株的结果。3．银杏叶片蛋白质组分研究结果表明，叶片中普遍存在的蛋白质包括：59kD、55kD、50kD、40kD、38kD、32kD、28kD、27kD、22kD、19kD、18kD、17kD、16kD蛋白。随

3、季节发生变化的蛋白质，单、双向电泳中均检测到55kD和32kD蛋白，双向电泳还分离到18kD的蛋白。55kD蛋白：雌株在11月初时发生转移，而雄株在10月中旬时大量转移，说明雌雄株在落叶时，营养的转移在时间上有差异，雄株早于雌株。单向和双向电泳中存在的差异应与双向电泳分辨率高有关。32kD蛋白：在11月份开始转移，且雌株变化幅度明显高于雄株，反映出32kD应是雌株中重要的贮藏蛋白。18kD蛋白：仅在双向电泳图谱上发现其明显的变化，在单向电泳中蛋白带未发生明显变化。其在11月份开始转移，11月中旬的图谱上几乎未发现此处的蛋白斑点。总之，银杏叶片内的蛋白质组分变化基本上发生在

4、11月，而大量的转移都发生在叶片全变黄，即将脱落时的11月中旬。4．银杏枝条的蛋白质组分研究结果表明，枝条中普遍存在的蛋白质包括：59kD、54kD、45kD、40kD、38kD、35kD、33kD、32kD、30kD、29kD、23kD、18kD、17kD、L6kD蛋白。发生变化的蛋白质，单、双向电泳图谱中均分离到59kD、32kD、27kD蛋白，双向电泳中还分离到40kD、38kD、22kD、18kD、16kD蛋白。在枝条的积累阶段和降解阶段中蛋白质变化情况不同。I．积累阶段59kD蛋白；无论雌雄株，其在11月上旬此蛋白开始积累，11月中旬显著增加。雄株在11月下旬时

5、即结束积累，达到最大值，而雌株的最大值在12月底。40kD和38kD：其在单向电泳中未发现明显变化。而双向电泳图谱中反映出雄株含量高于雌株，且都基本在11月时显著增加，12月底时达到最大值。32kD：在10月中上旬时的图谱中出现，之后逐渐积累，雄株在11月下旬达到最大，而雌株在12月末达到最大。27kD：无论雌雄株变化规律相同。10月中下旬在图谱中出现，11月下旬时达到最大值。22kD：在单向电泳中未发现其明显变化，但在双向电泳中反映出其斑点在图谱中逐渐增加，并在11月下旬时达到最大值。18kD：在11月上旬时显著增加，到11月下旬时达到最大值。i6kD：11月上旬即有较

6、大增加，但到12月时达到最大值。II降解阶段对单、双向电泳图谱的带或斑点的研究，都表现出从休眠阶段(11月下旬或12月底)具有高蛋白水平，当进入早春季节(2月中旬)时，蛋白质表现为急剧的减少，说明这些蛋白质为银杏萌芽提供营养，但不同蛋白质在雌雄株中的变动存在差异，并且从2月到3月图谱中，各蛋白质的表现也有较大的差异。59kD：在雌株中其变化较大，而雄株中变化较小，并且从2月到3月也表现为逐渐的减少。说明用于萌芽的59kD是雌株中的重要蛋白。40kD、38kD：从含量上比较雄株大于雌株，发生变化幅度也是雄株大于雌株，说明此蛋白质在早春时部分降解，但在降解阶段不属于主要的蛋白

7、。32kD、27kD：雌株发生变化大于雄株，但总体变化较小。22kD、18kD和16kD：在图谱中变化相对较小，但从2月到3月时各蛋白变化不同，表现为22kD、16kD发生量的增加，说明银杏在生长势增强后，吸收的营养会进行短暂的贮藏积累。而18kD蛋白从2月到3月的图谱上蛋白量还发生明显减少，说明其大量参与银杏的营养生长。5．银杏营养贮藏蛋白质VSP的确定：与叶片相关的VSP为55kD、32kD、18kD的蛋白。与枝条相关的VSP为59kD、40kD、38kD、32kD、27kD、22kD、18kD、16kD的蛋白。关键词：银