米非司酮对人宫颈癌HeLa细胞生长及其NFκBp65表达的影响

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1、米非司酮对人宫颈癌HeLa细胞生长及其NF-κBp65表达的影响【摘要】目的探讨米非司酮(mifepristone,MIF)对人子宫颈癌HeLa细胞增殖及其NF-κBp65蛋白表达水平的影响。方法体外培养人子宫颈癌HeLa细胞，采用MTT法观察不同浓度MIF(5、10、20μmol/L)对HeLa细胞增殖的抑制作用；采用Westernblot法检测MIF对HeLa细胞中NF-κBp65蛋白表达水平的影响。结果3个浓度的MIF均能显著抑制HeLa细胞的增殖，呈剂量依赖性；MIF可以使HeLa细胞中NF-κBp65蛋白表达水平下降。结论MIF

2、对宫颈癌HeLa细胞体外生长具有明显的抑制作用，并且下调HeLa细胞NF-κBp65蛋白的表达。【关键词】宫颈肿瘤;人宫颈癌HeLa细胞株；米非司酮；核因子-κBp65Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofmifepristoneoncellproliferationandtheexpressionofNF-κBp65ofhumancervicalcarcinomacelllineHeLa.MethodsHumancervicalcancinomacelllineHeLawascultured

3、invitro.Theantiproliferationeffectsofthreedifferentconcentrationsofmifepristone(5,10and20μmol/L)onHeLacelllineweredetectedwithMTTassay.WesternblotmethodwasperformedtoexaminetheeffectofmifepristoneontheexpressionofNF-κBp65proteinofHeLacellline.ResultsThreedifferent9concent

4、rationsofmifepristoninhibitedtheproliferationofHeLacellsinadose-dependingmanner.Theinhibitionbymifepristonereachedaplateauat20μmol/L.TheexpressionofNF-κBp65wasreducedbymifepristoneinHeLacells.ConclusionMifepristonehasasignificantinhibitioneffectonthegrowthofcervicalcarcin

5、omacelllineHeLainvitroandcandown-regulatetheexpressionofNF-κBp65proteinofHeLacellline.Keywords:cervixneoplasms;humancervicalcarcinomacelllineHeLa;mifepristone;NF-κBp65米非司酮(mifepristone,MIF)是20世纪80年代由法国RousselUclaf药厂人工合成的抗孕激素药物，目前在临床上主要用于终止早孕、引产等。但近年研究发现，MIF还具有抗肿瘤、增强抗癌药物疗效

6、等其他临床新用途；核因子-κB(nuclearfactorκB,NF-κB)是一种具有多向调节功能的核转录因子，它参与细胞的增殖、凋亡和癌基因的转录调控，并被证实和宫颈癌的发生发展密切相关［1-2］，NF-κBp65则是NF-κB在体内发挥生理功能的主要亚单位之一。目前，关于MIF对人宫颈癌HeLa细胞生长影响及其与NF-κBp65蛋白表达的关系尚少见报道，为此我们设计了此实验，研究不同浓度的MIF对人宫颈癌HeLa细胞生长及其NF-κBp65蛋白表达的影响，探讨MIF对宫颈癌的治疗作用及其可能的作用机制，为宫颈癌的防治寻找新途径。1材料

7、和方法91.1材料人宫颈癌HeLa细胞株（中国医学科学院血液病研究所，天津）；MIF纯粉剂（浙江仙琚制药股份有限公司）；DMEM干粉（美国Gibco公司）；MTT（美国Amersco公司）；NF-κBp65抗体（碧云天生物技术研究所）。1.2方法1.2.1细胞培养常规复苏冻存的宫颈癌HeLa细胞，接种于盛有DMEM培养液（含10%胎牛血清、105U/L青霉素、105U/L链霉素）的培养瓶中，细胞于培养液中在37℃、体积分数5%CO2、饱和湿度培养箱内培养，隔日更换新培养液1次。平均3～4天传代1次。1.2.2实验分组将培养的HeLa细胞随

8、机分为用药组和对照组。用药组：分为3个剂量组（n=6），分别含有浓度为5、10、20μmol/L的MIF，各组DMEM培养液中乙醇终浓度小于0.2%，含有7%胎牛血清。对照组（n=6）：培养液