白英提取液对Hela细胞凋亡及P53和Bcl2蛋白表达的影响

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1、白英提取液对Hela细胞凋亡及P53和Bcl-2蛋白表达的影响作者：韦星，李朝敢，农嵩，黄晓敏，王世疆【摘要】目的探讨白英提取液对Hela细胞凋亡及野生型P53(wtP53)和Bcl-2蛋白表达的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖抑制率，荧光显微镜检测癌细胞形态变化，TUNEL法检测凋亡率，二步法免疫组化检测P53和Bcl-2蛋白表达变化。结果白英提取液能够抑制Hela细胞增殖，且呈剂量依赖性；观察到凋亡细胞典型的形态特征；细胞凋亡率随白英提取液浓度增加而升高；P53蛋白表达显著上升（P<0.01），而Bcl-2蛋白表达明显下降（P<0.01）。结论白英提取

2、液能促进Hela细胞凋亡，其分子机制可能与上调野生型P53蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关。【关键词】白英提取液；宫颈肿瘤；Hela细胞；细胞凋亡；蛋白质P53；Bcl-2蛋白；基因表达　　EffectsofSolanumlyratumThunbextractoninductionofapoptosisandtheexpressionofP53andBcl-2proteininHelacells　　Abstract:ObjectiveTooutlinetheeffectsofSolanum11lyratumThunb(ST)extractoninductionofa

3、poptosisandtheexpressionofwildtypeP53andBcl-2proteininHelacells.MethodsAMTTassaywasusedtodetectthecellsproliferationinhibitoryrate.Morphologicalchangesofapoptosiswereobservedwithfluorescencemicroscope.InductionofcellapoptoticratewasdeterminedbyTUNELmethod.TheexpressionofP53andBcl-2protei

4、nsweredetectedbytwo-stepimmunohistochemicalstaining.ResultsSTextractcouldinhibittheproliferationofHelacellsandtheinhibitoryeffectwasdose-dependent.Typicalmorphologychangeswasfoundinapoptoticcells.Therateofapoptosisincreasedsignificantlywiththeincreasedconcentrationofthedrug.Theexpression

5、ofP53proteinelevatedsignificantly(P<0.01)，whileBcl-2proteindecreasedmarkedly(P<0.01).ConclusionSTcaninducetheapoptosisofHelacells，anditsmolecularmechanismmaybeassociatedwiththeup-regulatingexpressionofwildtypeP53proteinanddown-regulatingexpressionofBcl-2protein.　　Keywords:Solanumly

6、ratumThunbextract；cervixneoplasms；Helacells；apoptosis；proteinP53；Bcl-2protein；geneexpression11　　近年，关于中药抗癌机理的实验研究方兴未艾，有学者报道［1］，一些中药复方或单味药的有效成分能诱导肿瘤细胞凋亡，中药抗癌疗效与中药诱导肿瘤细胞凋亡有关。白英（SolanumlyratumThunb，ST）为茄科植物，又称白毛藤，临床常用于鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌等多种癌症治疗［2］。研究发现［3］，ST脂溶性提取物具有诱导人肝肿瘤细胞BEL-7404产生凋亡作用。迄今

7、为止，ST的抗肿瘤作用机理及其活性成分尚未完全明确。本实验观察ST水提取液诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡和抑制细胞增殖效应，以及其对野生型P53和Bcl-2蛋白表达的影响，以初步揭示ST抗宫颈癌作用机理。　　1材料和方法　　1.1材料　　1.1.1细胞人宫颈癌Hela细胞株由中科院上海细胞生物研究所细胞库提供。　　1.1.2主要试剂与仪器胎牛血清(FBS)、RPMI1640培养基为GIBCO公司产品，四甲基偶氮唑蓝（MTT）为上海普飞生物技术有限公司产品，Hoechst1133342为Sigma公司产品，顺铂（DDP）为锦州九泰药业有限责任