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时间:2019-05-11
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1、p16和Rb在宫颈上皮内瘤样变及癌中的表达作者:王冰 徐长福 王晓丽 莫立平 李明众【关键词】宫颈癌关键词:p16基因;Rb基因;宫颈上皮内瘤样病变;宫颈癌;免疫组化摘要:目的探讨p16和Rb基因产物在宫颈癌中的表达,及与临床病理参数间的关系.方法应用免疫组化技术(SP法),检测p16,Rb基因在10例正常宫颈组织、10例宫颈上皮内瘤样变(CIN)及59例宫颈鳞癌中的表达.结果20%CIN(2/10)和29%宫颈鳞癌(17/59)中,p16免疫反应阴性.p16蛋白表达缺失在不同年龄间有显著差异,而在肿瘤生长类型、临床分期及组织学分级各组间
2、比较无显著差异.宫颈癌中Rb表达阳性率为88%(52/59),随组织学分级增高,Rb蛋白表达率升高,各组间比较有显著差异.66%的宫颈癌两种蛋白共表达阳性.结论p16失活参与部分宫颈癌的发生.Rb可能主要通过功能性失活参与宫颈癌的发生. Keywords:p16gene;Rbgene;cervicalintraepithelialneo-plasias;cervicalcarcimoma;immunohis-tochemistry Abstract:AIMTostudytheexpressionofp16andRbin8cervica
3、lcarcinomaanditsrelationshipwithclinicopathologicfeatures.METHODSUsingSPimmunohistochemicaltech-nique,weexaminedtheexpressionofp16andRbin10nor-malcervicaltissues,10cervicalintraepithelialneoplasiasand 59invasivesquamouscellcarcinomas.RESULTS20%CIN(2/10)and29%cervicalcarci
4、nomas(17/59)showednega-tivep16staining.Abnormalp16expressionwasrelatedtoageofpatients.Therewerenostatisticallysignificantdiffer-encesinthep16statuswithrespecttogrosstype,histologicdifferentiationandstageofthedisease.Rbwasexpressedin52of59(88%)casesofcervicalcarcinomas.Rbe
5、xpressionwassignificantlycorrelatedwithhistologicdifferentiation(P<0.005).66%ofspecimenswasimmunoreactiveforbothRbandp16.CONCLUSIONInactivationofp16mayplayanimportantroleinthegenesisofhumancervicalcarcinoma.Rbmaybefunctionallyinactivatedincervicalcancer. 0引言 细胞周期调节失控
6、与细胞癌变密切相关[1].在细胞周期进程中关键限速点G1-S期的过度依赖于Rb蛋白的磷酸化,cyclin8D1与细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk4)结合并激活后者,使Rb蛋白磷酸化失活,促进细胞完成G1-S期过渡从而进入增殖状态[1].这一过程可通过p16蛋白与cdk4竞争性结合而受到抑制.此细胞周期调节通路中p16,cdk4,cyclinD1和Rb基因产物的异常表达在许多人类肿瘤中存在.我们着重探讨p16,Rb蛋白在宫颈癌中异常表达的频率及与临床病理参数间的相关性. 1材料和方法 1.1材料我院1997/1999手术切除和门诊活检宫颈
7、组织材料79例,取材后常规甲醛液固定,石蜡包埋,连续切片3张,1张行HE染色复诊.其中正常宫颈组织10例,上皮内瘤样变10例,宫颈鳞癌59例.年龄29~70(平均51)岁.FIGO临床分期:ⅡB期8例,ⅢA期1例,ⅢB期43例.病理分级按WHO方法:Ⅰ级7例,Ⅱ级24例,Ⅲ级28例.临床大体分型:菜花型30例,结节型18例,溃疡型3例,混合型1例(7例缺少年龄、临床分期、大体分型原始资料). 1.2方法采用SP免疫组织化学方法,p16,Rb兔抗人多克隆抗体为Santacruz公司产品,SP试剂盒为Zymed公司产品、一抗稀释度为1∶83
8、0.实验步骤按试剂盒说明书进行.将已知阳性的食管癌切片作为阳性对照,用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照.凡染色强度明显高于背景者为阳性表达,将阳性细胞按其数量及染色强度分为3级:表达弱阳性(+
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