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时间:2018-07-13
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1、PPARγ在子宫颈上皮内瘤样变和宫颈癌中的表达及意义【摘要】目的:研究过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)在子宫颈上皮内瘤样变(CIN)与子宫颈癌中的表达及其在子宫颈癌发生、发展中的作用。方法:应用Envision二步免疫组化法进行染色,检测54例CIN和43例子宫颈癌石蜡包埋组织中PPARγ的表达,以20例正常子宫颈组织作为对照进行研究。结果:PPARγ在CINⅠⅡ中的阳性表达率为44.12%(15/34),在CINⅢ中的阳性表达率为75%(15/20),在子宫颈癌中的阳性表达率为88.37
2、%(38/43),在正常子宫颈组织中的表达率为5.63%。从慢性子宫颈炎、CIN到子宫颈癌,PPARγ的表达呈递增趋势,与正常宫颈组织相比,CIN及子宫颈癌中PPARγ的表达率显著升高(P<0.01)。结论:在CIN及子宫颈癌组织中PPARγ的异常表达提示其与肿瘤的发生、发展密切相关,检测PPARγ有可能成为预测宫颈癌发展及预后的重要指标。【关键词】过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ);子宫颈癌;子宫颈上皮内瘤样变(CIN)过氧化物酶增殖物激活受体γ(Peroxisomeprolif
3、eratoractivatedreceptorγ,PPARγ)是一类由配体激活的核转录因子,属Ⅱ型核受体超家族成员。近年研究发现,其位于机体多种信号传导途径的交叉点,若被配体激活后可参与调节一些代谢途径,从而产生多种生物学效应,如诱导多种肿瘤细胞分化,并抑制其恶性增殖[1]。本研究旨在观察PPARγ在宫颈癌组织中的表达,探讨其在宫颈癌发生、发展过程中的作用,为进一步的深入研究提供理论依据。1材料与方法1.1材料选取新疆医科大学第一附属医院病理科2004~2006
4、年宫颈组织活检标本117例。其中维吾尔族48例,年龄25~70岁,平均年龄42.5岁;汉族62例,年龄32~69岁,平均年龄44.6岁。正常宫颈组织20例,CIN54例,其中CINⅠⅡ34例、CINⅢ20例(包括原位癌8例),宫颈癌43例(其中维吾尔族17例,汉族25例,回族1例)。以上标本均经临床和组织病理诊断证实。1.2试剂兔抗PPARγ多克隆抗体为浓缩型,由博士德生物技术有限公司提供。二抗采用兔抗鼠IgGEnvisionTM免疫组化检测试剂即用型工作液,购自DAKO(达克)公司。
5、1.3方法PPARγ的检测采用Envision二步免疫组化法。一抗的工作液稀释度为1∶20,切片常规二甲苯脱腊,梯度酒精水化,3%过氧化氢封闭15~20min,TrisEDTA(PH9.0)液进行微波抗原修复,TBS(PH7.6)冲洗。滴加一抗,4℃过夜,滴加1∶2稀释的二抗,37℃恒温箱孵育1h,DAB显色,苏木素复染,常规脱水,透明封片。以TBS代替一抗、二抗作阴性对照。1.4结果判定PPARγ阳性染色主要集中在细胞核,少数细胞核、细胞质均着色,呈棕黄色至深棕色颗粒状。
6、阳性反应判定标准依据阳性细胞数和阳性反应强度两项指标:阳性着色细胞数>15%定为阳性表达;阳性反应强度以浅黄色为弱阳性(+)、黄色或棕黄色为中等阳性(++),棕色或者深棕色为强阳性(+++),无棕黄色或与背景着色一致为阴性(-)。1.5统计学处理应用SPSS12.0软件对数据进行统计分析,采用等级资料的秩和检验,检验水准α=0.05。2结果2.1PPARγ在正常宫颈组织、CIN和子宫颈癌中表达的比较在CIN组织中PPARγ不仅在异型细胞中表达,而且在淋巴细胞、巨噬
7、细胞及新生血管内皮细胞中也表达,PPARγ在CINⅠⅡ中的阳性表达率为44.12%(15/34),其中10例(+)、4例(++)、1例(+++);在CINⅢ中的阳性表达率为75%(15/20),其中10例(+)、3例(++)、2例(+++);PPARγ在癌组织周边浸润区可见到染色程度比癌细胞更明显的间质表达,在高分化宫颈癌中的阳性表达率为88.46%(3/26),其中10例(+)、9例(++)、4例(+++);在低分化宫颈癌中的阳性表达率为88.24%(2/17),其中5例
8、(+)、6例(++)、4例(+++);在正常宫颈组织中PPARγ的阳性表达率为5.63%。PPARγ在CINⅠⅡ、CINⅢ、高分化宫颈癌、低分化宫颈癌中阳性表达率显著高于正常宫颈组织(P<0.01),而子宫颈癌组织中PPARγ的阳性表达率又高于CINⅠⅡ、CINⅢ,其表达差异有统计学意义(P<0.05),见表1。2.2PPARγ在汉族与维吾尔族妇女宫颈癌中表达的比较PPARγ在维吾尔族妇女宫颈癌中表达率为
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