体外培养鼠破骨细胞对牙体硬组织的吸收实验

《体外培养鼠破骨细胞对牙体硬组织的吸收实验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、维普资讯http://www.cqvip.com旦膣堂至年9月(第27卷第9期)Stomatolom,，Vo1．27，No．9，Sep．2007体外培养鼠破骨细胞对牙体硬组织的吸收实验张庆鸿，梁星，刘梦桃[摘要]目的本文旨在观察体外培养鼠破骨细胞对牙体硬组织的吸收。方法采用鼠长骨机械分离法获得破骨细胞，通过破骨细胞形态学观察及其特异性染色鉴定后，在牙本质上培养破骨细胞并用扫描电镜观察其吸收情况。结果鼠破骨细胞能在牙本质磨片上形成大小不～、形态不规则的吸收陷窝。结论长骨机械分离法可获得一定量特异性染色阳性的破骨细胞，并可在牙

2、本质磨片上形成明显吸收陷窝。[关键词]破骨细胞；吸收；硬组织；鼠[中图分类号]R780．2[文献标识码]A[文章编号]1003．9872(2007)09—0452—04ResorptionofratosteoclastsOndentineslicesinvitrocultureZHANGOing-hong，HANGxing，ldUMeng-tao．(DepoltmentofProsthetics，40~iatedStomatologyHospital，CollegeofMedicalSciences，ZhejiangUni

3、versity，l-l~u310006，China)Abstract：ObjectiveToobserveresorptionofratosteoclastsondentine．MethodsRatosteoclastswereobtainedthroughanatomiclong-bonetechnique．Aftertheosteoclastswereconfirmedthroughmorphologyandspecialdyeing，theywereculturedondentineandtheirabsorptio

4、nlacunaewereobservedthroughSEM．ResultsRatosteoclastscouldex(3avateirregularlacunaeondentine．ConclusionAnatomiclong-bonetechniquecouldprovideacertainamountofosteoclasts．whichwerepositivetospecialdyeingandcouldex(3avatelacunaondentine，Keywords：osteoclast；resorption；

5、seleroustissues；ratsStomatology，2007，27(9)：452—454，468在义齿修复、正畸牙移动、牙周重建、根周疾病、仪器厂，中国)，倒置相差显微镜(OLYMPUS，日本)，拔牙创和骨折的愈合以及牙齿的萌出等方面均涉及扫描电镜(KYKY一2800SEM，日本)。牙体硬组织的变化及骨代谢活动，而这些变化和活1．2方法动都与破骨细胞有着内在的联系【1-3J，破骨细胞与1．2．1破骨细胞的体外培养用断颈法处死sD大VI腔硬组织密不可分【4J。本文旨在通过体外培养的鼠，消毒，无菌条件下迅速解剖大鼠

6、双后肢软组织，破骨细胞对牙体硬组织的吸收实验，为口腔学科中分离出股骨和胫骨，放人4℃含1000U／ml的青霉牙体硬组织生理和病理性的变化做一探讨。素和链霉素的D—Hanks液中浸泡5min。用手术剪在4℃含30Ⅱll全a—MEM培养基(含20％胎牛血1材料与方法清、链霉素100U／ml、青霉素100U／m1)的小烧杯中1．1材料迅速将股骨和胫骨剪碎，置于漩涡混合器震荡3次，1．1．1实验动物实验动物为6周龄雄性SD大5s／次；静置20s后离心，弃上清液后用血球计数板鼠，体重为(170±10)g；实验者已获动物实验资格。把细

7、胞浓度调整至所需浓度。分别将细胞悬液接种1．1．2主要试剂和仪器医用超净工作台(Hohen，于24孔培养板中牙本质片上和培养孔中(细胞浓度美国)，细胞培养板(Gibco公司，美国)，a—MEM培均为107／m1)，3孔，置37oC、5％C02恒温培养箱养基(Hyclone公司，美国)，胎牛血清(Hyclone公司，内培养，30min后第1次换液，去除未贴壁细胞，以美国)，co2恒温培养箱(SANYO，日本)，离心机(北后每3h换液1次，共3次。整个实验均在冰块上完京医用离心机厂，中国)，漩涡混合器(上海青浦沪西成(平均温度

8、4oC)。使用倒置相差显微镜观察培养的细胞，特异性耐酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色。基金项目：国家自然科学基金资助项目(30271428)1．2．2牙本质片制备用硬组织切片机将收集的作者单位：l浙江大学医学院附属口腔医院修复科，杭州(310006)；2成人无缺损第三磨牙沿横切面剖开，于细砂石上磨四川大