秋茄多糖的提取及其组成的研究

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1、秋茄多糖的提取及其组成的研究【摘要】目的该文对红树植物秋茄中多糖的提取及其组成进行了研究。方法秋茄叶经热水浸提、Sevage法脱蛋白等方法得到多糖;经完全酸水解，糖腈乙酸酯衍生化，并用红外光谱仪、气质联用仪对其结构和组成进行了研究。结果秋茄多糖由D-阿拉伯糖和葡萄糖组成，它们的摩尔比为1∶2。结论秋茄多糖为杂多糖。【关键词】秋茄;多糖;提取;组分　近年来,国际上对药用红树植物的化学成分及其药理研究表明，红树植物具有抗艾滋病、抗肿瘤、抗氧化等活性[1]。秋茄为红树科秋茄属植物，本属只有一种，即为秋茄。秋茄因其特殊的生长环境，在其化学成分和生理活性方

2、面都具有很多特殊性。至今为止的秋茄研究资料表明，对秋茄化学成分和生理活性的研究在世界范围内较为分散，缺乏较深入或系统地研究。虽然人们现已从秋茄中分离出多个鞣质类化合物，但是关于其生物活性方面的研究并没有多少报道。本实验对红树植物秋茄中的多糖进行提取并对其组成进行了研究。　　1材料与仪器　　1.1原料秋茄叶(采自湛江东海岛)，洗净剪碎，置于通风处阴干，备用。5　　1.2试剂95%乙醇;无水乙醇;氯仿;正丁醇;丙酮;无水乙醚;硫酸;碳酸钡;吡啶;盐酸羟胺;乙酸酐，以上试剂均为分析纯。　　1.3仪器E-5299旋转蒸发仪(巩义市予华仪器有限责任公司);

3、SHB-B95A型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);GCMS-QP2010气相色谱质谱连用仪(岛津制作所);HH-S2系列恒温水浴锅(江苏省全坛市环宇科学仪器厂);FTIR-8400S型红外光谱仪(日本岛津公司);ESJ120-4型电子天平(沈阳市龙腾电子有限公司);202-2型干燥箱(上海市实验仪器总厂);GSP-84-02型磁力恒温搅拌器(山东电讯七厂)。　　2方法　　2.1多糖提取称取粉碎、干燥好的秋茄叶150g，加入1500ml蒸馏水，超声处理20min后加热到90℃，热水浸提3次，过滤，合并，得棕色滤液。用旋转蒸发仪浓缩滤液

4、至50ml，抽滤，滤液中加入3倍其体积的95%乙醇沉淀多糖，于冰箱放置过夜，得棕色絮状物，离心收集沉淀。　　2.2Sevag法去蛋白[2]Sevag试剂的配制：用氯仿与正丁醇以4∶51混合。上述沉淀加水溶解，即得棕色溶液，加入溶液1/3倍体积的Sevag试剂，剧烈振荡至无白色絮状物析出，然后离心，除去水相与有机相交界处的变性蛋白，剩余液体再加入200ml无水乙醇，充分振荡摇匀，于冰箱静置24h，得棕色絮状物。离心收集沉淀，沉淀经无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤两次脱去脂肪和色素，干燥，得棕色粗多糖1.1g。　　2.3红外光谱法(IR)鉴定多糖采用KB

5、r压片制样，在4000～400cm-1区间内用红外光谱仪扫描IR吸收。　　2.4多糖水解[3]称取30mg粗多糖，加入5ml30mmol/L的硫酸溶液，封管，超声片刻，至多糖完全溶解，100℃恒温水浴振荡2h。将试管置于烘箱中于110℃反应6h后冷却至室温，加BaCO3粉末中和、离心、干燥得到水解后的淡黄色单糖混合物0.0103g。　　2.5糖腈乙酸酯衍生物的制备称取10mg单糖样品和10mg盐酸羟胺，用20ml吡啶溶解，封管，95℃恒温水浴振荡40min后冷却至室温，加入0.6ml乙酸酐，封管，95℃恒温水浴振荡40min，冷却至室温，得淡黄色

6、单糖腈乙酸酯衍生物，待测。　　2.6单糖衍生物的GC/MS分析色谱条件：RTX-5石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，柱温：80℃，气化室温度：280℃，载气为高纯度氦气，进样量1μl，升温程序：起始温度80℃，保留时间2min，每分钟5℃升温到260℃，保留15min。质谱条件：离子源为EI源，灯丝电流0.6mA，离子源温度200℃，电离能量70eV，接口温度250℃，电子倍增管电压1.20kV，扫描周期0.5s，扫描范围30.00～400.00m/z，溶剂延迟3min。　　3结果与讨论　　3.1多糖红外光谱分析结果秋茄多糖的红

7、外光谱如图1所示，从图谱中可以看出秋茄多糖具有以下结构特征：在3600～3200cm-1的一个强峰是O-H的伸缩振动。1665～1625cm-1间吸收峰是糖的水化物的吸收峰。1200～1000cm-1间比较大的吸收峰是由两种C-O伸缩振动所引起的，其中一种是属于C-O-H的，另一种是糖环的C-O-C。在3000～2800cm-1的一组吸收峰是糖类C-H的伸缩振动引起的，1400～1200cm-1的不太尖的吸收峰是C-H的变角振动，这两组吸收峰是糖类的特征吸收峰。该样品具有典型的多糖特征峰。图1秋茄多糖的红外光谱图　　3.2单糖衍生物GC-MS分析

8、结果将糖腈乙酸酯衍生物进行GC-MS分析，经计算机内NIST02质谱数据库检索得到分析结果见表1。表1单糖衍生物GC/MS分析结果　　4