辛伐他汀对内皮祖细胞增殖、迁移、凋亡及黏附影响的研究

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1、南京医科大学硕士学位论文辛伐他汀对内皮祖细胞增殖、迁移、凋亡及黏附影响的研究姓名:杨乃全申请学位级别:硕士专业:心血管内科指导教师:张馥敏20080420南京医科大学硕士学位论文中文摘要目的:细胞水平观察不同浓度辛伐他汀对内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)功能的影响。方法:采用密度梯度离心法从人外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板上,培养7天后,收集贴壁细胞,通过激光共聚焦显微镜鉴定,FITC.UEA.I和DiI.acLDL双染色阳性细胞为EPCs。以不同浓度辛伐他汀(分别为0.0001、0.001、

2、0.01、O.1、1.0心I)或0.ol山辛伐他汀+P13K阻断#](LY294002)和EPCs培养24h。分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、流式细胞仪和黏附能力测定实验来观察辛伐他汀对EPCs的增殖、迁移、凋亡和黏附影响,并探讨LY294002干预作用。j,j...⋯.结果:辛伐他汀显著提高了外周_血-EPCs的增殖能力、迁移能力、抗凋亡能力和黏附能力(P<0.05)。辛伐他汀浓度在0.Ol⋯Vt时对EPCs功能影响达到最大。随着药物浓度的继续增大,EPCs的上述功能反呈下降趋势,但0.1州组仍高于对照组。辛伐他汀对EPCs㈣,影响能祓LY294

3、002(P13K.抑制剂)阻断。结论:辛伐他汀能增hrrEPCs的增殖、迁移、抗凋亡和黏附能力,其机制可能与P13K/Akt't言号途径有关。【关键词】:他汀类药物;内皮祖细胞;增殖;迁移;凋亡;黏附南京医科大学硕士学位论文ABSTRACTobjective:Toinvestigateinvitrowhethersimvastatinsofdifferentconcentrationshaveinfluencesonthefunctionsofendothelialprogenitorcells(EPCs).Methods:Totalmononuclearcel

4、ls(MNCs)wereisolatedfromhumanperipheralbloodbyFicolldensitygradientcentrifugation,andthenthecellswereplatedonfibronectin—coatedculturedishes.After7dayscultured,attachedcellswereisolatedandwereassessedwithalaserscanningconfocalmicroscope,EPCswerecharacterizedascellsdoublepositiveforDi

5、LDL-uptakeandIectinbinding.EPCsweretreatedwithsimvastatinsofdifferentconcentrations(O.0001、O.001、O.01、0.1、1.O山),orLY294002(P13Kinhibitor)+simvastatins(0.01rtM)for24h.TheinfluencesofSimvastatinsonEPCs’proliferation,migration,apoptosiswereassayedwithMTTassay,modifiedBoydenchamberassaya

6、ndFACSassay,respectively.EPCsadhesionassaywasperformedbyreplatingthoseonfibronectin—coateddishes,andthentheadherentcellswerecounted.Results:Simvastatinsstrikinglyimprovedtheabilityinproliferating,migrating,anti—apoptosisandadheringofEPCsisolatedfromhumanperipheralblood(p

7、tatinsatO.O1山concentrationreachedthemaximumeffectonEPCs.弭仍iletheconcentrationofsimvastatins南京医科大学硕士学位论文wasfurtherincreasedmorethanO.OlbtM,theaboveimprovementeffectsshowedatendencytodecline,buttheeffectsatO.1出concentrationwerestillgreaterthanthoseincontrolgroup.AndtheinfluenceofSimvas

8、tatinsonthes

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1、南京医科大学硕士学位论文辛伐他汀对内皮祖细胞增殖、迁移、凋亡及黏附影响的研究姓名:杨乃全申请学位级别:硕士专业:心血管内科指导教师:张馥敏20080420南京医科大学硕士学位论文中文摘要目的:细胞水平观察不同浓度辛伐他汀对内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)功能的影响。方法:采用密度梯度离心法从人外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板上,培养7天后,收集贴壁细胞,通过激光共聚焦显微镜鉴定,FITC.UEA.I和DiI.acLDL双染色阳性细胞为EPCs。以不同浓度辛伐他汀(分别为0.0001、0.001、

2、0.01、O.1、1.0心I)或0.ol山辛伐他汀+P13K阻断#](LY294002)和EPCs培养24h。分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、流式细胞仪和黏附能力测定实验来观察辛伐他汀对EPCs的增殖、迁移、凋亡和黏附影响,并探讨LY294002干预作用。j,j...⋯.结果:辛伐他汀显著提高了外周_血-EPCs的增殖能力、迁移能力、抗凋亡能力和黏附能力(P<0.05)。辛伐他汀浓度在0.Ol⋯Vt时对EPCs功能影响达到最大。随着药物浓度的继续增大,EPCs的上述功能反呈下降趋势,但0.1州组仍高于对照组。辛伐他汀对EPCs㈣,影响能祓LY294

3、002(P13K.抑制剂)阻断。结论:辛伐他汀能增hrrEPCs的增殖、迁移、抗凋亡和黏附能力,其机制可能与P13K/Akt't言号途径有关。【关键词】:他汀类药物;内皮祖细胞;增殖;迁移;凋亡;黏附南京医科大学硕士学位论文ABSTRACTobjective:Toinvestigateinvitrowhethersimvastatinsofdifferentconcentrationshaveinfluencesonthefunctionsofendothelialprogenitorcells(EPCs).Methods:Totalmononuclearcel

4、ls(MNCs)wereisolatedfromhumanperipheralbloodbyFicolldensitygradientcentrifugation,andthenthecellswereplatedonfibronectin—coatedculturedishes.After7dayscultured,attachedcellswereisolatedandwereassessedwithalaserscanningconfocalmicroscope,EPCswerecharacterizedascellsdoublepositiveforDi

5、LDL-uptakeandIectinbinding.EPCsweretreatedwithsimvastatinsofdifferentconcentrations(O.0001、O.001、O.01、0.1、1.O山),orLY294002(P13Kinhibitor)+simvastatins(0.01rtM)for24h.TheinfluencesofSimvastatinsonEPCs’proliferation,migration,apoptosiswereassayedwithMTTassay,modifiedBoydenchamberassaya

6、ndFACSassay,respectively.EPCsadhesionassaywasperformedbyreplatingthoseonfibronectin—coateddishes,andthentheadherentcellswerecounted.Results:Simvastatinsstrikinglyimprovedtheabilityinproliferating,migrating,anti—apoptosisandadheringofEPCsisolatedfromhumanperipheralblood(p

7、tatinsatO.O1山concentrationreachedthemaximumeffectonEPCs.弭仍iletheconcentrationofsimvastatins南京医科大学硕士学位论文wasfurtherincreasedmorethanO.OlbtM,theaboveimprovementeffectsshowedatendencytodecline,buttheeffectsatO.1出concentrationwerestillgreaterthanthoseincontrolgroup.AndtheinfluenceofSimvas

8、tatinsonthes

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