HSP70与挫伤损伤时间关系的实验研究

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1、华中科技大学硕士学位论文HSP70与挫伤损伤时间关系的实验研究姓名：顾天能申请学位级别：硕士专业：法医病理指导教师：秦启生2003.5.1硕士研究生举避论文：(HSPTO与挫伤攒伤耐间关系的实验研究j强天靛摘要挫伤(c011tusi011，bruise)是指皮肤遭受钝性暴力作用形成的一类非歼放谶损伤。伴有皮内、皮下甚至鼹凌组织薛基管破裂凄盘。挫伤是法医学鉴定实黢中最常见的一静损伤类型。挫伤的损伤时间推断在分析案情性质、确定死亡原因和评定伤病关系中有重要意义。以往的损伤时间研究主要集中在创伤和脑挫伤，对皮肤鼹魔软缓织夔糖伤磷究得缀少

2、，法医临床梭寨时主要用观察皮下出嫩颜色变化的方法进行推断，法医病理学检验主要是观察损伤部俄炎症反应及含铁血黄素染色、弹力纤维染色、纤维鬣白染色等，对于判断生{；蓼饶秽瑟磊伤有纛要意义，德对饶爱经过踺溺不能准确判断。7厂＼父SP?O是热休克蛋白家族中的一种，是一种应激蛋白，对其分布、功能、诱导和基因调控等的研究已相当戒熟，冀蕈壳隆及多夷隆抗体均容易获缛。该鬃自几乎存在于所有的体细胞中，以结构型和诱学型两形式存在，一般情况下主要以结构型存在于细胞中，但蘩2员鼗64员蹊士氍究氅毕避逡文：(HSPTOs挫伤镄巍踺间关系钓交验辑究》黪蹶疑含

3、量极低。诱导型ItSP70对环境、损伤及感染等致应激因子非常敏感，发爱疫激反应时其表达水平很快升高，缨燕蠹该蛋鑫静含量露达菲癍激状态对憋鼗吾倍，很多实验观察到在损伤的早期即肖高水平的袭达。本实验就是观察HSP70在皮肤和肌肉挫伤后的袭达规律，确定其表达与损伤时阍之闯有无耦关靛及能否应爝于、／挫伤煞损岱爵阗稚颧。i，本实验通过打击的方法制造大鼠左大腿皮肤及肌肉挫伤。选雌性SD大鼠80只随机平均分为i6组，损伤缀乙醚麻醉蜃褥弹餐打击器打击左大腿外嘲一次，形成典型豹皮默靛岗控伤，经簿裁证实宥鹱确静受癍、皮下及肌肉出血，按照伤届0min，

4、15min，30min，lh，2h，4h，8h，12h，16h，24h，36h，48，72h，96h分组酾头处琵动锪。空自对照缍麻醉后赴死，不打击。死螽接伤缎麻醉蓐先憝廷，然压打击秘嗣部往一次。对损伤组织先进行肉眼观察，然詹取材，置10％中性福尔马林内固定，常规石蜡切片两组，分别行常规HE染色及HSP70免疫缓仡染色《SABC法)，簧透光学显徽镜观察并诗数皮默搜饶缝边缘连续i0个筏翳内的繇性乏黎3夏接64爱磺士研究尘毕、监论文：CHSPTOs挫臻接伤时阑荚系的实骚研究》颗炎髓缨蠢管痰皮缨憨数农嚣嚣鼹挫伤靛边缘连续t00个骨鼹肌细胞

5、巾的阳性细胞数。用SPSS软件进行统计学分析。心采髭示：犬鼠软组织拯伤后岗眼观可见皮下出盘及局都肄孥胀，8～16h麓黢最重，48h螽舞娥消退。HE染色表现为伤厝立即出现局部组织挫碎、出血，挫伤灶及周围小动脉收缩、骨骼肌纤维收缩、扭曲，为挫伤的最早期特征。睫表现。肌纤维收缩于伤后l小时瀵失。小动艨收缩予伤嚣15mi鞋达高峰，30min震恢复并池现小静脉扩张充血，伤后1小时可见小动脉、小静脉及憨细血管均扩张充血。肌细胞变性于伤后15分锋汗始，表现为脆体肿胀、横纹消失，脆浆均质状，淡染，1小辩后达高峰，4小时螽发生坏死，泰坏死的细胞开始

6、逐渐恢复。皮肤罨细血管内皮细胞及纤维细胞核肿胀予伤后30分钟开始．2小时达高峰，可见核破裂，4小时居逐渐恢复。组织水瓣予伤后15分锋开始出现。皮肤予揍爱30分镑在挫伤灶边缘可冤少量萃核细胞浸润，伤后1小时予皮下出血灶浅侧缘出现薄层中性粒细胞浸润，12h后开始出现淋融细胞浸润。骨第4员欺64页暖士褥究耋攀泣论文：艘HSP70s挫伤镘臻翻洒关系豹窭疆职究》颧炎栽骼肌组织于伤后2小时开始出现中性粒细胞浸润，l2小时达高峰，16小时开始减少并出现肇核巨噬细脆浸澜，38小眩蜃转戈以萃核蹙噬缨戆浸濮为主；残纤维细胞的增生分别子伤聪24小时及3

7、6小时始见于皮肤及骨骼肌挫伤区，48及72小时分别于上述区域可见新生酶毛细血管形成，96小时螽新生的琵细血管充赧。根据瓣嚣染色的镜下表现可以大致拯断皮获瓿漆软挫伤后的经过时间，但不能进行精确掇断，间隔时间较长。HSP70免疫缝化染色发现：挫伤灶丽匿皮肤毛缩血管内皮缨腿予藐惹15撼in熟蹬现显著懿戆浆HSP70阳性染色，予4h达高峰，8h飚逐渐减弱，24h后恢复至伤前水平。肌细胞反皮稍慢，染色较淡，于伤后30tain出现烂著酶施浆阳性反应，12h达高峰，经过～个平台期，3醵震开始减弱，96h鬃恢复至绕翦水平。蹇穰镜下计数挫伤灶边缘连

8、续10个视野内的皮肤阳性毛细血管内皮细胞数及连续计数挫伤灶边缘100个完整的骨骼髋缩胞中的阳憔缁脆数，爝SPSSll+0forwindowS软件分辑发现经瑶4h内的蕞缨囊管姻梭数及伤盂12h藕5更懿64灵硬士醑究生攀犍论文；tItSPTO与挫镪损锈