海蜇胶原蛋白理化性质及其胶原肽的护肤活性研究

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1、中国海洋大学博士学位论文海蜇胶原蛋白理化性质及其胶原肽的护肤活性研究姓名：庄永亮申请学位级别：博士专业：食品科学指导教师：李八方20090601海蜇胶原蛋白理化性质及其胶原肽的护肤活性研究为71．87％，水解度为14．69％；碱性蛋白酶properaseE水解条件为pH9．1，水解温度为47．3℃、酶与底物比为2．8％，此条件下，水解产物的羟自由基抑制率为79．07％，水解度为17．89％。复合酶水解显著提高水解液清除羟自由基的能力和水解度，复合酶的最佳水解条件为碱性蛋白酶和胰蛋白酶混合水解，温度48．0℃，酶与底物的比值分别为2．8％和3．5％，pH9．

2、1，水解时间3h，此条件下，水解产物的羟自由基抑制率为94．24％，水解度为24．32％。从三种水解产物的分子量大小和氨基酸组成来看，单酶水解的平均分子量主要集中在2000Da左右，复合酶水解的平均分子量在700Da左右；三种水解产物氨基酸组成没有明显不同，富含Gly和Pro，总疏水性氨基酸含量在35％左右。4．以海蜇胶原蛋白复合酶水解液为原料，超滤获取三个不同分子量组分JCHl：Mw>3000Da；JCH2：1000Da

3、和脂质氧化抑制能力，并对超氧阴离子具有较高的清除能力，三种体系与浓度均呈正相关性，其中对超氧阴离子的抑制率与浓度呈线性关系；JCH2对羟自由基和过氧化氢活性氧清除效果明显，并体现出较好的铜螯合能力，量效关系明显。水解液中氨基酸的组成和分子量的大小直接影响其抗氧化能力的大小。5．通过体外培养小鼠B16黑素瘤细胞株，探讨了不同分子量胶原肽组分(JCHl，JCH2，JCH3)对细胞内黑色素合成的影响及作用机制。结果显示，三种胶原肽对细胞生长无任何影响(P>0．05)，体现了胶原肽无细胞毒性。胶原肽能够有效的降低B16黑素瘤细胞黑素含量(P<0．05，P<0．01

4、)，剂量效应关系明显，其中JCH2抑制能力高于JCHl和JCH3，浓度在1001．tg／ml时，黑色素含量降低了38．8％。从作用机制来看，相对于其它两组分，JCH2表现出较高的抑制酪氨酸酶活性(P<0．01)，浓度为50rt∥rra时，抑制率为40．5％；同时有效的增加细胞内GSH含量，降低GSSG含量，继而提高两者的比例(P<0．05，P<0．01)，保证细胞内的还原能力；另外，JCH2能够显著降低细胞内cAMP含量(P<0．01)，从而抑制酪氨酸酶的表达。6．通过紫外线诱发小鼠皮肤光老化模型，研究胶原蛋白和胶原肽对紫外线损伤的调节作用。结果显示，两者

5、能有效地缓解紫外线照射引起的光老化程度，胶原肽表现的生理活性高于胶原蛋白。胶原蛋白和胶原肽显著提高光老化模型的ll海蜇胶原蛋白理化性质及其胶原肽的护肤活性研究胸腺指数和脾指数，防止免疫器官的萎缩，延缓衰老。胶原蛋白和胶原肽能够提高小鼠皮肤及血清中SOD、GSH．Px、CAT等抗氧化酶活性及GSH的含量，同时降低MDA含量(P

6、的受损程度，保持I／III型胶原蛋白比例，改善弹性纤维排列与分布，促使皮肤富有弹性。关键词：海蜇；胶原蛋白；抗氧化；光老化；B16黑色素瘤细胞III海蜇胶原蛋白理化性质及其胶原肽的护肤活性研究StudyontheBiochemicalCharacterizationofCollagenandSkin．careActivityofCollagenpeptidesExtractedfromJellyfishRhopilemaesculentumAbstractJellyfish(Rhopilemaesculentum)isoneofthemostimporta

7、ntfisheryresourceinChina,whichhasthehigheconomic，nutritionalandmedicinalvalue．Inthispaper,collagenwithouttelopeptideswaspreparedfromtheumbrellaofjellyfshRhopilemaesculentumandthephsicochemicalcharacteristicswerestudied．TheappropriateproteaseandconditionofhydrolysisWasselectedtopro

8、ducecollagenpolypeptides．Theantio