il-27转染人食管鳞癌细胞抗肿瘤

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1、IL-27转染人食管鳞癌细胞抗肿瘤效应及其机理研究河北医科大学第四医院科研中心河北省肿瘤研究所刘丽华我国是食管癌的高发区，世界上约50%的食管癌发生在中国，到医院就诊的患者中95%为中晚期。尽管通过手术、化疗和放疗使食管癌的生存率得到很大提高，平均5年生存率仍为10%。近年来，肿瘤生物治疗受到了人们的关注，并逐渐成为肿瘤的第四种治疗方法。引言IL-12familymembers：IL-12,IL-23andIL-27isprimarilyproducedfromactivatedantigenpresentingcells(

2、monocytes,macrophagesanddendriticcells)whereasIL-35isproducedbyregulatoryTcells.Thesecytokinesareallcomposedoftwosubunits,ahelicalsubunit(IL-12p35、IL-23p19、IL-27p28、IL-35p35)andasolublecytokinereceptor-likesubunit(IL-12p40、IL-23p40、IL-27EBI3、IL-35EBI3).引言本研究旨在探讨IL-

3、27基因转染对人食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应及其对免疫功能的影响，探讨其抗肿瘤作用机制。目的细胞转染逆转录病毒载体(LXSN/IL-27)Ψ2病毒PA317polybrene病毒polybreneEca109Eca109/IL-27Ψ2/IL-27PA317/IL-27G418G418Eca109/LXSNG418Lipofectamine……方法Eca109/IL-27Eca109/LXSNEca109细胞1×107个细胞/只皮下接种腹腔接种成瘤性、生存期肿瘤体积建立动物模型（mm3）＝长径×短径2×1/2方法肿瘤组织

4、脾RNART-PCRT-bet,IL-12Rb2,TNF-a,IL-1bandIL-6免疫组化NKELISAIFN-gNK杀伤活性LDHIL-27对免疫调节作用研究方法Eca109/IL-27细胞的培养上清中检测到IL-27，其含量为153.73±7.0pg/ml。而在Eca109/LXSN细胞和野生型Eca109细胞的培养上清中未检出IL-27。结果蛋白水平鉴定转染成功Fig.1ExpressionofIL-27EBI3andp28geneindifferentcellsdectedbyRT-PCR.M:DNAmarker

5、;A:Eca109/IL-27cells;B:Eca109/LXSNcells;C:Eca109cells.基因水平鉴定转染成功EBI3(706bp)b-actin500bpMABCMABCP28(231bp)500bpb-actin结果IL-27基因表达**Fig.2Tumor’sgrowthinnudemiceinoculatedsubcutaneouslywithdifferenttumorcells.*vsEca109andEca109/LXSNgroupsrespectively,P<0.01IL-27对肿瘤生长的

6、影响生存期56±4day54±3day97±4day*结果Fig.3InfiltrationofNKcellsintumortissuesfromnudemiceafterinoculationwithdifferentcells.*vsEca109andEca109/LXSNgroupsrespectively,P<0.05Eca109/IL-27Eca109/LXSNEca10912.6±1.2%*8.4±0.9%7.8±0.7%IL-27对移植瘤组织NK细胞浸润数量的影响结果(*(**Fig.5Cytotoxicact

7、ivityofspleencellsfromnudemiceafterinoculationdifferenttumorcells.*vsEca109andEca109/LXSNgroupsrespectively,P<0.05IL-27对荷瘤裸鼠脾细胞免疫功能的影响结果*Fig.4IFN-gproductionfromspleencellsafterinoculationdifferenttumorcells.*vsEca109andEca109/LXSNgroupsrespectively,P<0.01Fig.6Gene

8、expressionintumortissuesafterinoculationdifferenttumorcellsdetectedbyRT-PCR.A:Eca109;B:Eca109/LXSN;C:Eca109/IL-27IL-27对移植瘤组织中细胞因子表达的影响结果本研究结果表明，接