生物类(生物科学等)专业毕业论文--RLK基因遗传转化植株的筛选与鉴定

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1、RLK基因遗传转化植株的筛选与鉴定生物技术专业指导教师摘要：番茄青枯病是严重影响番茄生产的病害之一，有“植物中的癌症”之称。植物体中类受体蛋白激酶(ReceptorLikekinaseRLK)有提高抗逆性的功能，本研究利用分子克隆技术将辣椒中的。。基因转入番茄中，以期获得对青枯病具有抗性的番茄植株。除了利用传统的形态学比较的方法外，本文主要利用PCR和RT-PCR技术对三个番茄品种的转基因植株的T1代进行转基因后的分子鉴定。结果显示，三种转基因番茄经特异引物PCR后均能产生特异性条带，而且D-RLK-6号经RT-PCR后能够产生特异的条带，这表明目的基因都已经成功转

2、入三种转基因番茄基因组内，并且能够顺利遗传给后代，另外D-RLK-6号的CaRLK基因能够顺利表达。此研究将为番茄青枯病的防治提供重要的理论支撑。关键词：番茄；CaRLK；分子鉴定；PCR；RT-PCR1414TheSelectionandIdentificationofCaRLKTransgenicTomatoesPlantsAbstract：Tomatobacterialwiltisaseriousdiseaseaffectingtomatoproductionanditiscalled"theCancerofPlant".TheReceptorLikekina

3、se(RLK)inplantscanincreasetheirresistancefunction.Inthisstudy,weusedmolecularcloningtechnologytotransfertheCaRLKfrompeppertotomato,hopingtoobtainbacterialwilt-resistanttomatoplants.Inadditiontousingtraditionalmethods,suchasmorphologicalcomparison,wemainlyusedPCRandRT-PCRtoidentifytheth

4、reevarietiesoftransgenictomatoplantsofT1generationofD-RLK-2,D-RLK-6andD-RLK-10.ResuLtsshowedthatthreetransgenicplantsaftertheprocessofPCRbyspecificprimerswereabletoproducespecificbands,andthattheD-RLK-6producedspecificbandaftertheprocessofRT-PCRbyspecificprimers,suggestingthattheCaRLKg

5、enehadbeensuccessfullytransferredintotransgenictomatogenome.Thisstudywillprovideimportanttheoreticalsupportforthepreventionandcontroloftomatobacterialwilt.Keywords：LycopersiconescuLentumMill；CaRLK；Molecularidentification；PCR；RT-PCR14引言番茄(LycopersiconescuLentumMill)别名西红柿，古名六月柿、喜报三元。其果实营

6、养丰富，具特殊风味，既可以作为水果又能作为蔬菜食用，可以生食、熟食、加工制成番茄酱、汁等。番茄因其产量高、营养丰富，深受人们的喜爱，是全世界栽培最为普遍的果菜之一，美国、苏联、意大利和中国为主要生产国。在欧洲、美洲的国家以及中国和日本有大面积温室、塑料大棚或者其他保护地设施栽培。中国各地普遍种植，栽培面积仍在继续扩大，但是由于连年种植造成的连作障碍严重，病害达40多种[1]，其中青枯病是严重影响番茄产量和质量的病害之一。植物青枯病菌具有广泛的寄主能够侵染54个科的450多种植物[2]，仅次于农杆菌的侵染性，是许多植物生产的重要限制因素[3]，其中番茄、烟草和马铃薯等

7、茄科作物受害最为严重。由于植物叶片被青枯病菌侵染发病枯死以后仍保持绿色或者浅绿色，故称青枯病。番茄青枯病是由茄科劳尔氏菌(Ralstoniasolanacearun)引起的，在热带、亚热带、温带地区广泛发生的一种细菌性土传病害[4]，番茄在发病时，尚无特别有效的药物或者方法进行防治，因而被称为植物的“癌症”，是世界上分布最广、危害最为严重且最难防治的重大细菌性病害。番茄青枯病在我国台湾及长江流域的各省均有发生，尤其以四川、湖南、江西、浙江、福建、广东、广西等地发病最为严重。番茄青枯病一般年份病死株率为20%-30%，发病严重时，田块病死株率可达80%以上，甚至造