本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达

本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达

ID:35610369

大小:453.50 KB

页数:19页

时间:2019-04-01

本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达_第1页
本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达_第2页
本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达_第3页
本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达_第4页
本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达_第5页
资源描述:

《本科生毕业论文--家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库

1、苏州大学本科生毕业设计(论文)目录摘要1前言31材料和方法41.1材料及主要试剂41.2方法41.2.1引物设计41.2.2PCR扩增目的片段41.2.3目的片段的分离和回收(Takara回收试剂盒)51.2.4酶切反应51.2.5连接反应61.2.6感受态细胞制备61.2.7连接产物的转化61.2.8试剂盒抽提质粒DNA61.2.9重组质粒的鉴定及测序61.2.10原核表达71.2.11SDS-PAGE蛋白电泳82结果92.1野桑蚕Serpin-2基因的cDNA序列克隆92.2野桑蚕Serpin-2基因的cDNA序列分析102.3Se

2、rpin-2重组表达载体酶切鉴定142.4蛋白质表达与SDS-PAGE分析152.5WesternBloting分析153讨论16参考文献:17致谢18附录1.19附录2.20-18-苏州大学本科生毕业设计(论文)家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-2的克隆、序列分析及表达及表达摘要本研究以家蚕中大造品种为材料,以其cDNA为模板克隆家桑蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin-2基因;采用大肠杆菌原核表达系统(BL21)进行家蚕Serpin-2基因的表达研究。主要结果如下:根据已知野蚕Serpin-2(GenBank登录号:AF24220

3、0.1)序列设计合适的引物,采用PCR方法克隆了家蚕Serpin-2基因。序列分析表明,家蚕Serpin-2基因编码区长度为990bp,编码329个氨基酸,相对分子量约为43.75kDa,等电点约为4.67。与家蚕Serpin-2比较发现,两者基因序列相似度高达99.29%,氨基酸序列相似度高达98.93%,推测家蚕Serpin-2与野桑蚕Serpin-2基因起着相同或类似的作用。将家蚕大造Serpin-2基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),转化到大肠杆菌BL21中,经1mmol/LIPTG诱导蛋白质表达。SDS-PAGE电泳分

4、析结果表明,经IPTG诱导转化家蚕Serpin-2的BL21菌与对照BL21菌、空pET-28a(+)转化BL21菌相比出现了一条特异性的蛋白质条带,相对分子量约44kDa,与预计的大小相符,证实家蚕Serpin-2在大肠杆菌中得到表达。家蚕Serpin-2基因的成功克隆和原核表达研究为从分子水平上解析Serpin在野桑蚕体内的功能打下了基础。关键词:家蚕;Serpin-2;基因克隆;原核表达-18-苏州大学本科生毕业设计(论文)CloningandprokaryoticexpressionofSerpin-2geneofBombyxm

5、oriAbstractInthisstudy,thegeneofSerpininBombyxmori(Serpin-2)wasclonedbyPCRusingthewholebodycDNAsastemplates.E.coliprokaryoticexpressionsystemwasusedforexpressionstudyofserpin-2gene.Themainresultsareasfollows:AccordingtothesequenceofBombyxmandarinaserpin-2gene,properprime

6、rwasdesignedandSerpin-2geneofBombyxmori(TheGenBankaccessionnumbers:AF242200.1)wasclonedbyPCR.Accordingtosequenceanalysis,the990bpcodingregionofSerpin-2encoding329aminoacidresiduesresultsintheoreticalmolecularweightof43.75kDa,isoelectricpointof4.67.CompariedtotheSerpin-2g

7、eneofBombyxmoriandBombyxmandarina,thegeneidentityandaminoacididentityreach98.7%,respectively.ItrevealsthatSerpin-2ofBombyxmoriandBombyxmandarinamayplayasameorsimilarrole.TheSerpin-2genewasconstructedtotheprokaryoticexpressionvectorpET-28a(+)andthentransformedintoE.coliBL

8、21(DE3).And1mmol/LIPTGwasusedtoinducethetargetproteintoexpress.SDS-PAGEanalysisindicatedthattherewasasp

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。