柑橘黄龙病病原的分子检测及其菌16srdna序列分析

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1、柑橘黄龙病病原的分子检测及其16SrDNA序列分析孙大光1>2,郑雪芳2,刘波“,阮传清2,范国成3,HallD.4,段永平4(1福建师范大学生命科学学院,福州350108;2福建省农业科学院农业生物资源研究所,福州350003;3福建省农业科学院果树研究所,福州350003:4美国农业部佛罗里达园艺试验室,弗罗里达34945)摘要:调査一棵红心柚不同部位叶片的黄化惜况,采用Nested-PCR技术检测叶片柑橘黄龙病病原,通过DNA测序构建系统发育树比较不同地区柑橘黄龙病病原菌之间的进化关系。结果表明柑橘不同部位黄化叶片都携带有柑橘黄龙病病原,同时部分非黄化叶片也携带有柑橘黄龙病病原

2、。不同部位叶片内的柑橘黄龙病病原16SrDNA的同源性高达99%.Citrus与广东、湖南、重庆、广西、日本等地区的柑橘黄龙病病原菌16SrDNA序列同源性达到99%,citrus与印度、巴西、非洲内尔斯普雷特柑橘黄龙病病原16SrDNA序列同源性分别为98%、97%、97%,citrus与巴西圣保罗、非洲好望角柑橘黄龙病病原16SrDNA序列同源性分别为96%、94%o关键词:柑橘黄龙病;巢式PCR;16SrDNA;系统进化分析AnalysisaboutCitrushuanglongbingpathogen16SrDNAsequenceSUNDa-guang12,ZHENGXue-

3、fang2,LIUBo2RUANChuan-qing2,FANGuo-cheng3,HallD.4,DUANYong-ping41・CollegeOfLifeScienceFujiannormaluniversity,Fuzhou350003,China;2.AgriculturalBioresource.ResearchInstitute,FujianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou350003、China;3.ResearchInstitute,ofPomology,FujianAcademyofAgriculturalSciences,

4、Fuzhou350003,China;4.USDA-ARS-USHRL,FortPierce,FL34945,U.S.AAbstract:YellowleaveswerecountedindifferentdirectionsofaCitrusgrandisOsbeck.ChandlertheandusingNesled-PCRdetectionofcitrusleafpathogenwerecarriedoutandthroughDNAsequencingphylogenetictreewasbuilttofindouttheevolutionaryrelationshipbetw

5、eendifferentpartscitnisHLBpathogens.TheresultsshowedthatdifferentpartsofCitrusyellowleaveswerecarryingcitruspathogen,whilesomenon-yellowingleavesalsocarrythecitruspathogentoo.Theidentitylevelamongdiilerentpartsofthecitrusleafpathogen16SrDNAwasupto99%andwasthesamewiththeIndianHLBisolateGuangdong

6、,Hunan,Chongqing,GuangxiandJapan.Theidentityvalueswere98%、97%>97%withIndia,Brazil,AfricanusNclspruitrespectively.Bycontrast,theidentityvalueswere96%、94%withSaoPauloandAfricanuscapensis.Keywords:CitrusHuanglongbing;Nested-PCR;16SrDNA;Phylogeneticanalysis柑橘黄龙病(CitrusHuanglongbing,简称HLB)又叫柑橘青果病(Ci

7、trusgreeningdisease)是柑橘生产中敲严重的病害Z—⑴。柑橘黄龙病病原菌是一种只限于韧皮部内寄生的革兰氏阴性细菌,属于变形菌门的(X亚群,根据病原的热敏性、传播媒介等可以将其分为亚洲种(CandidatusLiberibacterasiaticum),非洲种{CandidatusLiberibacterafricanus)和美洲种(.CandidatusLiberibacteramericanus)3个种。我国的黄龙病病原为亚洲种(CkL.

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