快速检测单头柑橘木虱体内黄龙病病原

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1、万方数据2008年第J期植物检疫PLANTQUARANTINE快速检测单头柑橘木虱体内黄龙病病原木李菁-·2冯旭祥·，，徐建华t邓晓玲¨’(1．华南农业大学资源环境学院植物病理系2．广西壮族自治区植保总站3．广州番禺出入境检验检疫局)AsimpleandeffectivemethodforquickdetectionofHuanglongbingagentfromAsiaticpsyllid(Diaphorinacitri)．LiJin91一，FengXuxian91·3XuJianhual，DengXiaolin91(1．DepartmentofPlantPathology，So

2、uthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510640；2．PlantProtectionGeneralStationofGuangxiZhuangAutonomousRegion；3．PanyuEntry—ExitInspectionandQuarantineBureau，Guangzhou)AbstractAsiaticcitruspsyllid(D／aphor／nacirriKuwayama)iscurrentlytheonlyinsectvectoridentifiedtOtransmitcitrusHuanglongbing(HLB)

3、pathogenandisoneofthemostimportantpestsincitrusproduction．Throughthefeedingprocess，citruspsyllidsacquimtheHLBagentfrominfectedsourcesandtransmitthepathogentohealthyflees，eventuallyleadingtoaHLBepidemicifnocontrolmeasureistaken．DetectionofHLBagentfromcitruspsyllidisofparticularimportanceforthed

4、iseasecontr01．Inthisstudy，throughadoptinganewmethodforsamplingofcitruspsyllidandcarryingoutgeneralPCR，theHLBagentcouldbedetectedfromsinglecitruspsyllid．AfterusingXbaItOcutthePCRamplifyproductoftheHLBagent’S16SrDNA，twopiecesofsegmentwhichare520bpand640bpcouldbeobtain．Theresultindicatestheagentb

5、elongstOCandidatusLiberibacterasiaticus．Thismethodhastheadvanmgesofbeingsimple，convenientandfastoverthepreviouslydescribedproceduresindetectionofHLBagentfromcitruspsyllids．KeywordsAsiaticpsyllid，CitrusHuanglongbing，Detection摘要本研究通过采用简易的柑橘木虱制样方法，利用PCR检测技术在单头柑橘木虱体内检测到黄龙病病原，并利用XbaI限制性内切酶将从柑橘木虱体内扩

6、增的黄龙病病原16SrDNA酶切成520bp和640bp两个片段，证实了木虱体内黄龙病病原为亚洲种。本研究成功地建立了一套快速检测柑橘木虱体内黄龙病病原的方法，可为检疫工作者和相关研究人员提供重要参考。关键词柑橘黄龙病柑橘木虱检测中图分类号$432．41柑橘黄龙病(CitrusHuanglongbing)是一种世界性的毁灭性病害，是我国检疫性有害生物之一，对柑橘生产危害极大[11。该病害是由一种限制于韧皮部筛管细胞内的难培养细菌所引起的，称为韧皮部杆菌属。在2004年以前，柑橘黄龙病仅在亚洲、非洲的国家和地区发生【2I。但在2004年5月和2005年9月分别在巴西圣保罗州和美国佛罗

7、里达州发现了黄龙病【31。由于巴西和美国是世界柑橘生产的大国，目前柑橘黄龙病的研究工作受到世界各国的高度重视。柑橘黄龙病最早是在我国广东省汕头地区开始发现【41，20世纪60年代随着柑橘生产的发展，该病害发生逐渐严重，在广东、广西、福建、海南及台湾等省的柑橘产区广泛蔓延，摧毁了大量的柑橘树【研。20世纪80年代以后，又在江西、浙江、四川、云南、贵州和湖南等省的部分柑橘产区陆续发现黄龙病，植检部门加强了对该病害的检验检疫工作，防止了病害的扩散蔓延【61。柑橘黄龙病的传播