亚洲玉米螟丝素轻链基因的克隆、表达分析及rnai

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2、霉鲜《著丰譜業树搞ＣＬＯＮＩＮＧＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＡＮＤＲＮＡＩＮＴＥＲＦＥＲＥＮＣＥ，ＯＦＦ化ＲＯＩＮＬＩＧＨＴＣＨＡＩＮＧＥＮＥＩＮＯＳＴｉＷＶＺ４ＦＵＲＮＡＣＡＬＩＳＢｙＬｉＺｈｏｎｇ乂的ＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＳＵＢＭＩＴＴＥＤｍＰＡＲＴＩＡＬＦＵＬＦＩＬＬＭＥＮＴＯＦＴＨＥＲＥＱＵＩＲＥＭＥＮＴＳＦＯＲＴＨＥＤＥＧＲＥＥｏｒＭＡＳＴＥＲＷＩＴＨＭＡＪＯＲＩＮＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＩＮＳＥＣＴ＆ＰＥＳＴＣＯＮＴＲＯＬＡＤＶＩＳＯＲ－：ＰＲＯＦ

3、ＥＳＳＯＲＹＡＮＧＹｉＺｈｏｎｇＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＪＩＡＮＧＳＵ，ＹＡＮＧＺＨＯＵ，ＣＨＩＮＡＭＡＹ，２０１５李忠亚洲玉米頓丝素轻链基因的克隆、表达分析及ＲＮＡｉＩ摘要一亚洲玉米頓（化化加ａｗｍａｃｏ姑）是种分布广泛且多食性的害虫、／，对我国的玉米棉花危害较大。为研究亚洲玉米換的化丝机理，本文克隆了亚洲玉米暢的丝素轻链基因片段且进行了全长拼接，并研究了在其不同发育阶段、不同温度、不同寄主条件下该基因的相对表达量；同时，通过饲喂法对亚洲玉米換丝素轻链基因进行了ＲＮＡ千扰。现将研

4、究结果报告如下：１、采用ＲＡＣＥ技术克隆到亚洲玉米換丝素接链基因的ｃＤＮＡ全长（已提交ＧｅｎｅＢａｎｋ：ＫＦ６６９６４５）。该基因全长１０９８ｂｐ，自３９ｂｐ至８３０ｂｐ为其开放阅读框，起始密码子ＡＴＧ，终止ＴＡＡ－密码子，共编码２６３个氨基酸，相对分子量为９２．７６ｋＤａ，等电点ｐｉ为４．９９。通过同源性比对，亚洲玉米換丝素轻链基因与棉大卷叶暢（卸崎ＷａｄｅｒａｇｔｆａＦａｂｒｉｃｉｕｓ）同源性最高，扣ｗ’７５％Ｃｏｒ６９％为，与外米缀蛾（ｃｙｒａｃ巧ｃａ的同源性为；与大蜡赎（说航）０的同源性为６８％。２、运用实

5、时英光定量ＰＣＲ、，检测了在不同发育阶段、不同温度条件喂食不同寄主后亚洲玉米候丝素轻链基因的相对表达量。结果表明，丝素轻链基因在５龄幼虫时相对表达量最高，其次是２龄幼虫与３龄幼虫；当幼虫进入预蛹后，该基因相对表达量开始降低，’‘‘‘°至成虫时，相对表达量几乎为零；研究了２２Ｃ，２５Ｃ，２８Ｃ，３１Ｃ，３４Ｃ条件下亚洲玉米‘螺丝素轻链基因的相对表达量，发现３４Ｃ时相对表达量最高；在棉花、玉米、酸模叶寥Ｈ种寄主间，，取食棉花的亚洲玉米嗔丝素轻链基因的表达量最高其次分别是玉米、酸模叶寥。文章对处于逆境条件下玉米惕丝素轻链基

6、因的相对表达量较高进行了讨论。３、通过饲喂法，将表达目标基因ｄｓＲＮＡ的菌液饲喂亚洲玉米螺幼虫，检测沉默效果。结果发现，相对于喂食添加了清水的常规饲料的亚洲玉米娱幼虫（ＣＫ），喂食添加了表达ｄｓＲＮＡ菌液饲料的亚洲玉米嗔的丝素轻链基因表达量分别下调了３４．８１％、３５．０５％。经过ＲＮＡ干扰后，相对于对照，亚洲玉米換的幼虫发育历期缩短０．９９ｄ、蛹重下降８．巧％、单雌产卵量减少３４．８６％。这表明丝素轻链基因表达量的降低与亚洲玉米操的生长发育是有关联的。关键词：亚洲玉米嗔丝素轻链基因达分析ＲＮＡ干扰；；表；Ｈ扬州火

7、学硕：ｂ学位论文ＡｂｓｔｒａｃｔＡｓｉａｎｃｏｍｂｏｒｅｒＯｓｔｒｉｎｉａｕｒｎａｃａｌｉｓｉｓｏｎｅｏｆｏｌｈａｏｕｓｅｓｔｓｗｈｉｃｈｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｗｉｄｅｌ｛）ｇ，ｆｐｙｐｐｙ虹Ｃｈｉｎａ．Ｉｔｉｓａｌｓｏｔｈｅｋｅｙｉｎ化ｃｔｏｆｃｏｍａｎｄｃｏｔｔｏｎ．虹ｏｒｄｅｒ化ｓｔｕｄｙｔｈｅｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｂａｓｉｓｏｆＡ－－ｗｓｉａｎＣｏｍｓｉｎｎｉｎｔｈｅｆＵＩｌｌｅｎｇｔｈｓｅｕｅｎｃｅｏｆｆｉｂｒｏｉｎｌｉｈｔｃｈａｉｎｅｎｅ

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