亚洲玉米螟免疫相关模式识别受体基因β-1,3-grp的cdna克隆及表达分析

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1、＾，＾号Ｗ２０８７４户５＇沪。０‘（．當敬神一穿一聲４；＾电？硕壬学位｛＾文＼／！）（学术型）ｒ种－亚洲玉米頓免疫相关模式识别受体基因知厶《？（７／？尸＾的ｃＤＮ乂克隆及表达分斩．，＾－奈５＾吴桃燕指导教师姓名：冯从经教授，扬州大学，江苏扬州，２２５００９申请学位级别：硕壬学科专业名称；农业尾虫与害虫防治论文提交日期：２０１５年４月论文答辩日期；２０１５年５月＜学位授予单位：扬州大学学位授予日期：２０１５年６月｜｜＾答辩委员会主席：韩召军＾＇２。！５年４月＼庐炎－等＼＇－

2、．．．ＡＶＴ＾１ＣｌｏｎｉｎＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａ田ｄＥｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＲＰａｇ，ｐＰ，ＰａｔｔｅｒｎＲｅｃｏｎｉｔｉｏｎＲｅｃｅｔｏｒＲｅｌａ化ｄ！：〇ＩｍｍｕｎｉｔｏｆｇｐｙＯｓｔｒｉｎｉａｆｕｍａｃａｌｉｓＧｖＬｅｎ从ＬａｒｖａｅＡ化ｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄａｓＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓＦｏｒ化ｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｗｉｔｈＭａｏｒｉｎｇｊＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＥｎｔｏｍｏｌｏｇｙ＆ＰｅｓｔＣｏｎｔｒｏｌ

3、ｇ化ＹａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＴａｏｙａｎＷｕＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＣｏｎｇｉｎｇＦｅｎｊｇＡｐｒｉｌ，２０１５ＹａｎｚｈｏｕＰ？化Ｃｈｉｎａｇ，目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３文献综述５１昆虫的天然免疫系统５２模式巧别受体在露虫天然免疫中的作用８２．１Ｔｏｌｌ和Ｉｍｄ两种信号途径８２．２模式识别受体９３国内外关于ｐＧＲＰ的研究进展９４研究目的和意义．１０参考文献１１１前Ｓ１４２材料与方法１５２１供试昆虫１５

4、．２．２主要试剂１５２．３ｉ要仪ｇ１５２．４息ＲＮＡ提取１６一２．５ｃＤＮＡ第链的合成１６－间片段扩增２玉米填幼虫片１．６亚洲人基因中７２．６．１引物设计与合成１７－－ＰＣＲ护增２．６０７间片段ＲＴ１７．２／片，基因中２．６．３目的基因片段的回收纯化１７２６４目的片段与１８．．克隆载体连接２．６．５连接载体转化１８２．６．６单菌落ＰＣＲ检测１８２．６．７测序１８＇－－２．７３ＧＲＦ基因的３ＲＡＣＥ１９２．７．１引物设计１９２．２操１９．７作步碟＇２７－．．３３ＲＡＣＥ

5、产物的克隆测序２０＇＞－－－－２．８０／５Ｇｉｙ因的５ＲＡＣＥ２０／公，基＇－２１．８．Ｔａｋａｒａ５ＲＡＣＥ反应原理和引物设计２０２．８．２操作步骤２１＇－．．３ＲＡＣＥ产物的２３２８５克陰测序２．９序列的生物信息学分析２４２－－化性质分析１２４．９．数据库搜索及亚洲玉米培０／店人基因编码蛋白的理＞２－－－．９２２４．亚洲玉米培０／？／３６化因编码蛋白的结构和功能预测／，基虫０／－核普酸序列推导的氨基酸序列的系统进化树构建２．９．３基于惡知＿？２５，－－２－．１００１３ＧＲＰ重组蛋白原核表达探索２５／Ｐ

6、，２组表达质粒－．１０．１重ＥＴ２化（＋）的构建２５ｐ２．１０．２重组表达２５２玉米巧０－－．１１亚洲／声人基因表达的民ｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ检测２８２．１１．１細菌诱导物的制备２８２．１１．２亚洲玉米增幼虫细菌诱导物的注射及解剖２８２．．３ｅａｌｔｉｍｅＰＣ民检测２９１１Ｒ２１．１．４数据分析３０３结則分析３０－？－３．１０／ＪＧ兄Ｐ基因ｃＤＮＡ全长序列３０／伊，３丄－－１０／户厶中间片段的克隆３０＇＇３丄２－ＣＥ０／片基因全长ｃＤＮＡ序列的３ＲＡ和５ＲＡＣＥ３２－３丄３０－

7、／３Ｇ壯基因全长ｃＤＮＡ序列的克隆３３／片，３－－．２０／片／ＪＧ／ＩＰ基因的生物信患学分析３４，－－核普酸序列和氨基酸序列３．２．１０／户／，基因的３４３－．２．２０／片厶基因核巧酸序列和致基酸序列的ＢｌａｓｔＰ分析３６－３．２．３０片／基因的系统进化树３８／，－３－－．２．４Ｑｆ９Ａ３ＧＪＷ基因信号化、跨膜结构、翻译后修饰Ｗ及疏水性分析３８ｙ－－－ｋ３．２乂及功能结构域分．５０／ＪＧｉ？？的呈维结构４１／片，析－－．３５／的原核表达３