组织工程脱细胞气管基质材料的制备及性能研究

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4、项目（８１１７００１４）＂＂５、扬州大学高端人才支持计划资助（２０１４３１）－江苏省普通高校研究生科研创新计划项目６、（ＣＸＬＸ１３９２５）＿２扬州大学硕±学位论文＿组织工程脱细胞气管基质材料的制备及性能研究硏究生：潘枢导师：史宏灿教授中文摘要气管病变主要由先天狭窄、感染、创伤、肿瘤等引起，气管切除并端端吻合是其治疗金标准。气管病变切除范围超过成人气管长度的１／２或儿童的１／３，则需要气管替代物来重建气道的连续性。组织工程是结合工程技术和生物学原理应巧于功能性组织替代的一个

5、新兴研究，Ｗ促进受损组织再生，有望成为长段气管重建的有效治疗手段。本研究（＾＾新西兰兔为对象，制备和评估ＮａＣ１０４处理后气管基质的生物性能，经综合比较筛选出最佳浓度，，并监测其免疫原性和排斥反应为同种异体气管移植提供实验依据。第一部分脱细胞气管基质材料的制备及生物性能检测目的：制备脱细胞气管基质材料，并检测其相关性能，遽选最佳高氯酸钢ＮａＣＤ（４）处理浓度。方法：１、获取经ＮａＣｌ〇４处理的气管基质；２、通过扫描电镜及ＤＡＰＩ染色观察基质结构及细胞去除情况；３、细胞外基质内ＧＡＧ量

6、化及生物力学测试；４、组织学及软骨细胞活力检测评价气管基质ＥＣＭ的黏膜及软骨情况。结果；工程气管的内壁具有一１、扫描电镜巧ＥＭ图观察到，该生物个完整的基底膜ＢＭ，这将）（）保留包括渗透屏障在内的很多生物功能；２、ＮａＣｌ〇４脱细胞过程，能有效去除气管基质的黏膜层的细胞分子，黏膜下腺体和软骨一膜，但使力学性能有定程度下降，而监测基质内的ＧＡＧ含量却能得Ｗ保存；３、组织学监测５％ＮａＣｌ〇化学处理能够保留气管基质材料的结构：即去除了黏膜上皮细４、、、胞黏膜固有层细胞腺体，而基底膜连接完整，胶原蛋

7、白弹力纤维和网状纤维未完全破坏，且能保留基质内的软骨细胞。结论：，ａＣＤ脱细胞方案对ＥＣＭ成分在该项研巧中我们综合比较不同浓度Ｎ４化学、微观结构和力学性能及去除免疫原性效率，经扫描电镜、ＤＡＰＩ染色、ＧＡＧ量化、生物力学潘枢狙织工程脱细胞气管基质材料的制备及性能研巧检测及组织学分析，遽选最佳脱细胞浓度，Ｗ获取适合同种异体组织工程气管重建的基质材料。第二部分体内外评估脱细胞气管基质材料的免疫排斥反应目的：研究经最佳ＮａＣｌ〇，４脱细胞浓度处理后，气管基质材料的免疫原性和排斥反应为同

8、种异体气管移植研究提供实验依据。方法：１、体外通过免疫组化方法检测基质材料的ＭＨＣ类分子表达；２、经同种异体移植验证脱细胞基质材料的免疫排斥反应；３、对移植物进行组织学分析及检测受体体内血清免疫球蛋白来评价免疫排斥反应。结累：１、免－疫组化染色示，主要表达于上皮层，黏，和软，