狐源犬瘟热病毒sd(14)7分离株全基因组序列分析及致病性研究

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院学位论文狐源犬瘟热病毒SD(14)7分离株全基因组序列分析及致病性研究CompleteGenomeSequenceAnalysisofCanineDistemperVirusSD(14)7StrainOriginatedfromFoxandPathogenicResearch硕士研究生：孙彦刚指导教师：闫喜军研宄员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：特产研究所研究生院2015年06月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDis

2、sertationCompleteGenomeSequenceAnalysisofCanineDistemperVirusSD(14)7StrainOriginatedfromFoxandPathogenicResearchM.S.Candidate：SunYangangSupervisorsProf.YanXijunDegree：MasterofVeterinarianSpecialty：VeterinaryMedicineJune2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽

3、我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年上月日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，g卩：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位

4、论文的全部或部分内容。研究生签名：时间：年Jr月>/日导师签名:时间：M七年t月>/曰中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目狐源犬瘟热病毒SD(14)7分离株全基因组序列分析及致病性研宄动物传染病及其病论文作者孙彦刚专业兽医研宄方向原分子流行病学指导教师闫喜军培养单位（研究所)特产研究所姓名职称硕（博)单位专业签名评硕导口柳增善教授吉林大学微生物学博导■阅硕导口杜锐教授吉林农业大学预防兽医学人博导■答辩主席硕导口钱爱东教授吉林农业大学预防兽医学博导■硕导口军事医学科学院王兴龙研究员预防兽医学博导■军事兽医

5、研究所硕导口■^^高丰教授吉林大学预防兽医学博导■答硕导■吉林省畜牧兽医傅殿国研究员预防兽医学博导口总站辩硕导■吉林特研生物技吴烕研宂员预防兽医学博导口术有限公司委员会议记录（秘书）范琳琳论文答辩时间地点2015年5月18日长春所区七楼会议室摘要犬瘟热病毒（Caninedistempervirus，CDV）引起的犬瘟热（Caninedistemper，CD）虽然有有效的疫苗防控，但是还维持着高感染率和高死亡率，给养犬业、毛皮动物养殖业以及野生珍稀动物的保护带来很大危害。近年来，中国主要毛皮动物养殖区内时常发生犬瘟热，并且传染

6、性强，致死率高，因此研究当前流行毒株的变异性和动物致病性，对犬瘟热的有效防控非常重要。本研究于2012～2014年从山东、河北、辽宁省收集疑似犬瘟热的水貂、狐狸和貉病料，克隆测序了15条F蛋白信号肽区（Fsp）基因序列、10条H基因序列和12条F基因序列。Fsp基因系统发育进化分析结果表明，15株CDV野毒株均属于中国当前流行的Asia-1基因型。H、Fsp、F2和F1氨基酸序列相似性分析显示，H和Fsp的变异率较高，F1其次，F2变异率最低。H和F基因系统发育进化分析显示，测序的毒株均属于Asia-1型，与疫苗株遗传距离很

7、远。H和F氨基酸序列比对结果显示，大部分毒株H氨基酸出现了I542N和Y549H变异，潜在的N-糖基化位点数为10个，Fsp蛋白变异率很高。中国主要毛皮动物养殖区内犬瘟热的发生，不是由于疫苗毒株返祖毒株增强所致，可能与H蛋白Y549H变异、潜在的N-糖基化位点数目增加以及Fsp蛋白发生变异有关。采用Vero-SLAM细胞从山东省荣成市某养殖场疑似犬瘟热病毒感染狐狸的肺脏中分离得到1株病毒，经鉴定为CDV野毒株，命名为SD(14)7。克隆测序了SD(14)7的全基因组序列，并对其全基因组和H基因序列进行了分析。结果表明，SD(

8、14)7株的全基因组序列长15690nt，与LN(10)1株的全基因组相似性最高为98.8%，与疫苗株的相似性较低为91.9%～92.2%。系统发育树分析结果表明，该毒株属于Asia-1型，为中国当前流行的CDV野毒株。对H氨基酸序列进行分析，发现SD(14)7株发生了I542N和Y549