桑花叶型萎缩病病原的鉴定

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1、密级：论文编号：中国农变科学院学位论文桑花叶型萎缩病病原的鉴定IdentificationofPathogensAssociatedwithMulberryMosaicDwarfDisease硕士研究生：马宇欣指导教师：李世访研宄员申请学位类别.•农学硕士专业：植物_^研究方向：分培养单位：植物保护研宄所研究生院2015年5月密级:论文编号:中国农业科学院学位论文桑花叶型萎缩病病原的鉴定IdentificationofPathogensAssociatedwithMulberryMosaicDwarfDisease硕士研究生：马宇欣指导教师：

2、李世访研究员申请学位类别：农学硕士专业：植物病理学研究方向：分子植物病理学培养单位：植物保护研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationIdentificationofPathogensAssociatedwithMulberryMosaicDwarfDiseaseM.S.Candidate：MaYuxinSupervisor：Prof.LiShifangMajor：PlantPathologySpecialty:Molecularplant

3、pathologyMay2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：夕年5月日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，5卩：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印

4、、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研宄生签名时间：交年/月二日中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目桑花叶型萎缩病病原的鉴定分子植物病论文作者马宇欣专业植物病理学研究方向理学指导教师李世访研究员培养单位（研究所）植物保护研究所硕（博）姓名职称单位专业签名导师评硕导口清华大学生命科学学生物化学与刘玉乐教授博导■院分子生物学阅硕导口中国农业科学院植物王锡锋研究员植物病理学人博导■保护研究所答辩主席硕导口中国科学院微生物研方荣祥研究员微生物学

5、博导■究所硕导口中国农业大学农学与范在丰教授植物病理学P博导■生物技术学院硕导口中国农业大学农学与韩成贵教授植物病理学博导■生物技术学院If答硕导口中国农业科学院植物周雪平教授植物病理学博导■保护研究所辩硕导口北京大学生命科学学生物化学与李毅教授博导■院分子生物学委硕导口博导口员硕导口博导口硕导口博导口会议记录（秘书）张志想论文答辩时间地点2015年5月17日上午8:30，植保所第一会议室摘要桑花叶型萎缩病（Mulberrymosaicdwarfdisease,MMDD）是一种困扰桑树生产长达数十年的重要病害，感病的桑树会表现出植株矮小、叶片

6、花叶、畸形、皱缩、叶缘卷曲等症状，严重影响桑蚕产业的发展。虽然对该病害的研究开展了近一个世纪，但对于其病原却至今未明确。鉴于此，本研究以探究桑花叶型萎缩病的病原为目的，系统的开展研究工作。首先，选取陕西省安康学院蚕桑科研基地进行样品采集，重点采集表现花叶型萎缩病症状的桑树样品92份，无症状样品9份。选取感病和健康样品各1份进行高通量测序技术，从感病样品中检测到2种病毒：双生病毒、线虫传多面体病毒和一种小分子环状RNA，而此健康样品中未检测到病毒病原物。通过RT-PCR/PCR实验验证了这三种病原物确实存在于感病样品中。其次，对所有样品中这三种

7、病原物的发生率进行了调查，发现感病的92份样品中，双生病毒的检出率为92.4%，线虫传多面体病毒的检出率为52.17%，小分子环状RNA的检出率为40.2%。因此，双生病毒与花叶型萎缩病的发生存在正相关关系；而线虫传多面体病毒的检出率也较高，与双生病毒可能存在混合侵染的情况存在；由于从健康的样品中也检测到小分子环状RNA的存在，因此小分子RNA与病害的发生没有相关关系。我们通过实验得出双生病毒与花叶型萎缩病具有极大的相关关系，但仍需根据科赫氏法则来进行致病性验证，最终确定是否为该病病原。最后，鉴于此双生病毒与花叶型萎缩病的相关关系，将其命名为

8、桑花叶型萎缩病相关病毒（Mulberrymosaicdwarfassociatedvirus,MMDaV），并对其进行了鉴定。采用PCR法和RCA的方法克隆得到了双