华南蚕区桑枯萎病病原菌的分离与分子鉴定.pdf

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1、5Cienceoft5eritcUltOure；

2、誊2012，38(6)：0981—0987ISSN0257—4799；CN32—1115／SE—mail：CYKE@chin~ouma1．net．cn华南蚕区桑枯萎病病原茵的分离与分子鉴定戴凡炜罗国庆王振江李磊r唐翠明邝哲师赵祥杰叶明强肖更生(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所，P-~,H510610；江苏科技大学，江苏镇江212003；广东省农业科学院，P-'~l'l510642)摘要桑枯萎病是华南蚕区危害严重的桑树病害。从广东和广西主要蚕区收集桑枯萎病病株

3、样本47份，利用TTC培养基分离到优势菌株105株，根据其培养特性选择10株代表性菌株以水培桑苗进行致病力鉴定，结果表明10个菌株均具有致病性，致病率60％～90％。结合菌株培养特性和16SrRNA序列分析，推断分离选择的l0个菌株分另I】属于肠杆菌科的肠杆菌属(Enterobacter)、克雷白氏杆菌属(Klebsiella)和泛茵属(Pantoea)等3个菌属。基于菌株16SI’RNA序列的系统发育分析结果显示：菌株Dafeng08—1和Yingde07属于肠杆菌属的阴沟肠杆菌(E．cloacae)，菌株Li

4、anjiang07和Mengshan07属于肠杆菌属的阿氏肠杆菌(E．asburiae)，菌株Leizhou07和Wengyuan07属于克雷白氏杆菌属的肺炎杆菌(尼pneumoniae)，Xuwen07和Huazhou07菌株属于雷白氏杆菌属的克雷伯氏菌(variicola)，Guishibiel0—1菌株属于克雷白氏杆菌属的产酸克雷伯氏茵(K．oxytoca)，Luogang07菌株属于泛菌属的菠萝泛茵(P．ananat~s)。由此可见，l起华南蚕区桑枯萎病的病原茵具有多样化特征。关键词桑枯萎病；病原菌；致病

5、性；16SrRNA序列；系统发育树中图分类号$888．71文献标识码A文章编号0257—4799(2012)06—0981—07IsolationandMolecularIdentificationofthePathogenCausingMul-berryWiltDiseaseinSouthernSericulturalAreasofChinaDAIFan—Wei’LUOGuo—Qing’WANGZhen—JiangLILei’，TANGCui—MingKUANGZhe—Shi’ZHAOXiang—JieYEMi

6、ng—QiangXIAOGeng—Sheng。(Sericulture＆Agri-FoodResearchInstitute，GuangdongAcademyofAgriculturalSciences，Guangzhou510610，Chi-na；JiangsuUniversityofSconceandTechnology，Zhenjiangd~ngsu212003，China；。GuangdongAcademyofAgri-culturalSciences，Guangzhou510642，China)Abst

7、ractMulberrywiltdiseaseisoneofthemulberrydiseaseswhichcauseseriousdamagetomulberrytreesinsouth—ernsericulturaJareasofChina．Inthisstudy．47sampleswerecollectedfrOmmulberrytreesinfectedbymulberrywiltdis—easeinsericulturalareasofGuangdongandGuangxi．fromwhich105pr

8、edominantbacterialstrainswereseparatedusingTTCmedium．BasedontheirculturaIcharacteristics．10representativestrainswereselectedforfurtheranalysisofpathogenicitytomulberryhydroponicseedlings．Theresultsshowedthatall10strainshadinfectivitytomulberrywithin·fectionra

9、terangingfrom60％tO9O％．Combinedwiththecuturalcharacteristicsand16SrRNAsequenceanalysis，the10selectedstrainswereidentifiedasmembersofthegeneraEnterobacter，Klebsiella，andPantoeaofEnterobacte