草莓枯萎病菌的分离与鉴定-论文.pdf

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1、第53卷第14期湖北农业科学Vo1．53NO．142014年7月HubeiAgriculturalSciencesJu1．，2014草莓枯萎病菌的分离与鉴定王振华，张建坤，龚国祥，邱国强，陈建军，冯汉利(1．湖北出入境检验检疫局，武汉430050；2．武汉理工大学，武汉430070)摘要：从湖北省武汉市郊区草莓种植户的大棚内采集萎蔫的植株．分离致病茵．采用PCR扩增、病原菌形态鉴定、致病性、分子检测等方法检测草莓枯萎病菌。结果表明，形态观察为尖孢镰刀茵(Fusariumoxys—porurn)．

2、接种草莓后出现典型的草莓枯萎病菌症状：采用真菌的通用引物对ITS1和ITS4进行PCR检测。分离得到的致病茵株均能扩增出分子量为567bp的特异性条带。结合形态、致病性测定和分子检测．确定分离和鉴定的病原茵为草莓枯萎病菌(FusariumoxysporumSchlecht．f．sp．fragariaeWinksetWilliams)。关键词：草莓枯萎病菌(FusariumoxysporumSchlecht．f．sp．fragariaeWinksetWilliams)；分离：鉴定；PCR检测中图分

3、类号：$436．68文献标识码：A文章编号：0439—8114(2014)14—3297—03IsolationandIdentifcationofFusariumoxysporumSchlecht．f．sp．fragariaeWinksetWilliamsWANGZhen-huaI,ZHANGJian-kun2，GONGGuo-xiangI,QIUGuo-qiang，CHENJian-jun，FENGHan-li(1．EntryandExitInspectionandQuarantineBur

4、eau，Wuhan430050，China；2．WuhanPolytechnicUniversity，Wuhan430070，China)Abstraction：WiltingstrawberryinthegreenhouseofstrawberrygrowersinthesuburbofWuhancityofHubeiprovincewasusedtoexploreaPCRdetectiontechnologyofFusariumoxysporumSchlecht．f．sp．fragariae

5、WinksetWilliams．DNAbandsof567bpwereobtainedfromroot，leaf，blossomandfruitisolatesofinflectedhostswithPCRfoucusingonITS1andITS4regionsbyunversalfungalpfime~．DNAsequencingresultsshowedthattheseamplifiedproductshadhighhomologywiththerelatedsequenceinGenB

6、ank，NCBI．Combinedwithpathogeninoculationandisolationofroot，leaf，blossomandfruit，morphologicalobservationandpathogenicity，theunversalprimer-PCRestablishedinthisstudycouldbeabasicmethodofdetectingFusariumoxysporumSchlecht．f．sp．fragariaeWinksetWilliams．

7、Keywords：umoxysporumSchlecht．f．sp．fragariaeWinksetWilliams，plantquarantine，Isolation，Identifcation，Moleculardetection草莓枯萎病菌(F~o2-iumoxysporumSchlecht．1材料与方法f．sp．fr~ariaeWinksetWilliams)为半知菌亚门瘤座菌科的尖孢镰刀菌草莓专化型[1]．可引起草莓根1．1材料腐。被列为中国对外公布的检疫性有害生物．在中1．1．1样品

8、来源2013年3月于武汉市东西湖区、国草莓种植地有报道]草莓枯萎病菌可通过植物湖北省农业科学院草莓种植户的大棚内采集萎蔫病残体和混杂在草莓中的病土远距离传播本试验的草莓植株对武汉市东西湖区、湖北省农业科学院草莓种植区1．1．2草莓品种晶玉。田问发病草莓采用病组织分离、单菌落分离检测，1．1-3培养基马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基；判定病原为尖孢镰刀菌(F／．／~ariumoxysporum)，用分康乃馨叶片琼脂(CLA)培养基：将新鲜的康乃馨叶子检测方法得到了验证。现将研究情况报道如下。片剪切