黄瓜疫病菌拮抗细菌的分离及鉴定-论文.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgn．Sci．2014．42(20)：6692—6693责任编辑乔利利责任校对况玲玲黄瓜疫病菌拮抗细菌的分离及鉴定伍善东，刘冬华，郭照辉，单世平(湖南省微生物研究院，湖南长沙41o009)摘要[目的]筛选对黄瓜疫病有较好稳定防治能力的生防茵。[方法]采用系列稀释法和平板涂布法对黄瓜疫病菌拮抗细菌进行初步分离．进一步通过平板对峙法对其进行筛选，并通过形态学、生理生化特征、16SrDNA序列分析方法对拮抗效果较好的细菌进行了鉴定。『结果]共分离到黄瓜疫病病原菌的桔抗细菌56株，有4株细菌对黄瓜疫病病原菌显示出较强的拮抗效

2、果，其中LY-38菌株对黄瓜疫病病原茵拮抗带宽为6．5mm，抑茵率高达81．2％，通过鉴定可以确定该菌株为枯草芽孢杆茵(Bacillussubtilis)。[结论]为黄瓜疫病的田间生物防治提供了参考。关键词黄瓜疫病：拮抗细菌；鉴定；枯草芽孢杆菌中图分类号S436．421．1文献标识码A文章编号0517—6611(2o14)2o一06692—02IsolationandIdentificationofAntagonisticBacteriaagainstPhytophthoramelonisWUShah．dongetal(HarianProvincialInst

3、ituteofMicrobiology，Changsha，Hunan410o09)Abstract『0biective]TheaimwastoobtaingoodantagonisticbacteriaagainstPmelonis．[MethodlSomeantagonisticbacteriaagainstP．meloniswereisolatedfromsoilbyusingserialdilutionmethodandspread—platemethod．furtherscreenedonplate．Thenefflcientantagonisticb

4、acteriaagainstP．meloniswereidentifiedbyusingmorphology．physiologicalandbiochemicalcharacteristicsand16SrDNAsequenceanalysis．『Result1Fifty．sixbacteriawereinitiallyisolatedbytlleserialdilutionsandplatecoatingmethodandhaveanantagonisticefectoncucumberhlightpathogen．Fourofthemwerefurthe

5、ridentifiedbytheplateconfrontationmethodandshowedstrongantagonisticeffectoncucumberblightpathogen．LY一38showedtheantagonismbandwidthof6．2UlITIOilcucumberblightpathogenandtheinhibitionrateof81．2％．TheLY．38strainwasjdentifiedasBacillussubtilis．『Conclusion]rI1leresearchresultprovidesrefe

6、renceforfieldbiologicalcontrolofmdon／s．KeywordsPhytophthoramelonis；antagonisticbacteria；Identification：Bacillussubtilis黄瓜疫病是一种黄瓜毁灭性土传病害，由疫霉菌(Phyto—从未发病植株的根际取土样，称10g土壤直接放人盛有90phthoramelonis)侵染所引起⋯，苗期至成株期均可染病，一旦Hll无菌水(带玻璃珠)的三角瓶内，振荡10min。依梯度稀发病，可造成黄瓜大面积死亡，减产幅度在加％～30％，是影释至l0～。从10～、10～、1

7、0各吸取稀释液1ml，分别加入响黄瓜生产的重要因素之一，病菌以28～30℃为最适生长灭菌培养皿中。每个稀释浓度3次重复。待样品都加入培温度。目前，该病的防治以化学药剂为主，但由于病菌的抗养皿后，分别注入预先溶化并冷却至45℃的牛肉膏蛋白胨药性，防治效果越来越差。在土壤中引进拮抗性微生物防治培养基l5～20『nl，使菌悬液和培养基充分均匀混合。将接植物土传病害的研究已有60多年，并取得一定成果。抗种好的培养皿倒置放人30℃恒温培养箱中培养2～3d。挑生素2507是新研制的可防治黄瓜疫病和丝瓜霜霉病等多种取单菌落移接到试管斜面上。再将分离所得原始菌株划线病害的药剂

8、，田间防治效果达到70％～80％。林壁