重要海洋病原细菌迟钝爱德华氏菌感染小鼠及细胞的研究模型建立

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1、華荣化犬勞论文目:重要海洋病原细菌迟钝爱德华氏菌感染小鼠及细胞的研宄模型建立学科专业海洋生物学研究方向海洋微生物论文作者倪春山指导教师刘琴教授定稿日期:年丄—月巧日学位论文使用授权声明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华东理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文涉密情况:不保密□保

2、密,保密期(年—月—日至年月日)学位论文作者签名指导老师签名:日期:年月)日日期月》日分类号密级:华东理工大学学位论文重要海洋病原细菌迟钝爱德华氏菌感染小鼠及细胞的研宄模型建立倪春山指导教师姓名:刘琴教授)华东理工大学阿华生物工程研宂所申请学位级别:硕士专业名称:海洋生物学论文定稿日期:论文答辩日期:学位授予单位:华东理工大学学位授予日期:答辩委员会主席:评阅人:作者声明我郑重声明:本人恪守学术道德,崇尚严谨学风。所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研宄工作所取得的结果。除文中明确注明和

3、引用的内容外,本论文不包含任何他人已经发表或撰写过的内容。论文为本人亲自撰写,并对所写内容负责。论文作者签名:年月么日华东理工大学硕士学位论文第页重要海洋病原细菌迟钝爱德华氏菌感染小鼠及细胞的研究模型建立摘要虽然迟钝爱德华氏菌是一种重要的鱼类病原细菌但据国内外文献报道,同时也能感染鸟类、爬行类、哺乳类等高等脊椎动物,甚至人类。因此,成功建立迟钝爱德华氏菌感染小鼠及其相关细胞的模型至关重要,这可以为我们深入考察病原菌和宿主之间的相互作用奠定基础,帮助我们开发出用来防治迟钝爱德华氏菌的有效药物和疫苗。同

4、时,由于鱼类和哺乳动物的免疫系统具有较高的相似性,我们还可以借助小鼠模型来弥补一些鱼类模型上的技术弊端,使得我们利用更多实验技术手段更深层次地探讨病原菌或疫苗与宿主之间的相互关系。本课题首先探索建立了迟钝爱德华氏菌野生株感染小鼠的实验模型,分析了不同感染途径下小鼠体内细菌数变化、小鼠发病率、半数致死剂量、小鼠发病症状,结果表明:野生株能使小鼠感染并使其发病或死亡。基于上述小鼠的感染模型,我们比较了迟钝爱德华氏菌的型分泌系统缺失株和型分泌系统基因缺失株的感染治病情况,结果表明和是细菌感染小鼠模型的关键

5、致病因子。此外,我们建立了小鼠骨髓来源巨噬细胞、骨髓来源中性粒细胞以及多种小鼠原代组织上皮细胞的分离培养及鉴定方法。基于上述小鼠细胞模型,我们进行了迟纯爱德华氏菌的细胞感染实验,结果表明:在巨噬细胞模型上能诱导产生炎症小体及细胞焦亡,而且经巨噬细胞调理的对于小鼠原代组织上皮细胞具有显著增强的致病性。此外,在感染前期能被小鼠中性粒细胞有效杀伤或抑制。本研宄建立了迟钝爱德华氏菌感染小鼠及相关细胞的研究模型,为深入研究该病原菌与宿主相互作用机制打下了基础。关键词:迟钝爱德华氏菌;小鼠;细胞;感染模型第页华

6、东理工大学硕士学位论文,,,,,,华东理工大学硕士学位论文第页目录第章文献综述迟钝爱德华氏菌小鼠作为感染模型的研究小鼠来源的细胞作为模型的研宄小鼠骨髓来源巨噬细胞分离鉴定及相关研究小鼠中性粒细胞研究传代细胞模型研究小鼠组织器官原代细胞分离及相关研宄本课题研宄内容及意义第章迟钝爱德华氏菌野生株感染小鼠的研究实验材料细菌及实验动物主要实验试剂与缓冲液养基主要实验器材及仪器设备实验方法不同注射方式、不同注射剂量下小鼠存活率半数致死量计算感染动力学研宄小鼠感染病症冷冻组织切片和病理组织切片实验结果不同注射方

7、式、不同注射剂量下小鼠存活率统计小鼠半数致死量测定结果迟钝爱德华氏菌感染动力学结果对小鼠致病性表现冷冻组织切片和病理组织切片分析誠第章迟钝爱德华氏菌各种突变株感染小鼠的研究第页华东理工大学硕士学位论文前言实验材料细菌及实验动物主要实验试剂与缓冲液培养基主要实验器材及仪器设备实验方法相关基因缺失株感染小鼠动力学考查相关基因缺失株小鼠体内早期定植能力考查菌株在小鼠体内感染动力学实验结果相关基因缺失株感染小鼠动力学结果相关基因缺失株小鼠体内早期定植能力菌株在小鼠体内感染动力学结果讨论娜第章感染小鼠模型的研

8、宄館实验材料细菌、细胞株及实验动物主要实验试剂与缓冲液主要实验器材及仪器设备实验方法骨髓来源巨噬细胞分离及培养对的黏附及内化能力考察刺激产生炎症小体情况细胞焦亡情况小鼠血清中测定实验结果细胞及分离、分化增殖结果流式细胞仪鉴定结果对的黏附率和内化率炎症小体激活及焦亡结果使小鼠在早期产生炎症小体舰华东理工大学硕士学位论文第页辦第章感染中性粒细胞模型的研宄前实验材料细菌、细胞株及实验动物主要实验试剂与缓冲液培养基主要实验器材及仪器设备实验方法中性粒细胞分离培养杀菌实验实验结

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