色谱指纹图谱应用于六神曲质量控制研究

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1、分类号：R282.71单位代码：10193密级：公开学号：2012192硕士学位论文色谱指纹图谱应用于“六神曲”质量控制研究TheresearchofMassaMedicataFermentata'squalitycontrolbyChromatographicFingerprint作者姓名：谢彦博学位类别：硕士学位专业名称：生物化学与分子生物学研究方向：生物大分子结构的研究指导教师：刘洪章所在学院：生命科学学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，

2、论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅

3、，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日吉林农业大学硕士学位论文前言摘要“六神曲”是中国传统发酵中药，有着悠久的历史，是中药药效成分转化的代表之一。唐初《药性论》中记载“六神曲”其性温、味甘、辛、归脾和胃经。在

4、汉代便已记载其配方，有青蒿、辣蓼、苍耳草、赤小豆、苦杏仁配以面粉和麦麸按一定比例经自然发酵制成的曲剂。一般呈立方形小块，表面灰黄色，粗糙，质脆易断，微有香气，具有健脾和胃和消食调中等功效，主要适用于治疗食积不化、脘腹胀满、食少泄泻和小儿腹大坚积等症状。“六神曲”应用广泛，2010年版《中国药典》和《部颁标准》中，共收载了400个含发酵类中药的成方制剂，市售的多种中成药制剂中都含有“六神曲”如小儿保安丸、山楂化滞丸和八宝瑞生丸等。但目前“六神曲”市场混乱，质量差异显著。在2000年药店中记载主要凭感官和经验鉴定“六神曲”的好坏，缺乏可以量化的质量评价方法和标

5、准。所以亟需建立科学有效的“六神曲”质量评价标准。本论文分别对各产地“六神曲”有效成分进行提取,建立HPLC色谱条件仪器方法，测定了各产地“六神曲”中青蒿素、芦丁和槲皮素的含量，同时建立了“六神曲”HPLC色谱指纹图谱，并对“六神曲”中5种原材料进行了HPLC分析，结果如下：1，确立了“六神曲”提取方法本文通过对比煎煮法和超声法，煎煮法更符合中药口服理念，且更加安全，色谱图比对煎煮法的效果更佳，确定使用水提煎煮法。2，建立了“六神曲”HPLC色谱条件仪器方法通过对四种不同类型色谱柱及在不同流动相比例下的条件摸索，及对柱温、流速和波长的探索，选用Acchro

6、mXAquaC18色谱柱进行洗脱，则建立的HPLC色谱指纹图谱仪器方法为：流动相为100%超纯水，柱温30℃，进样量10μL，流速为1mL/min，波长为280nm。3，测定“六神曲”中青蒿素、芦丁和槲皮素的含量HPLC法也是目前中药成分分析的主要方法，该方法简单易行，灵敏度高。作为“六神曲”原材料中的主要中草药，青蒿素是青蒿的主要成分，芦丁和槲皮3吉林农业大学硕士学位论文前言素是辣蓼的主要成分。它们不仅是“六神曲”成品的主要药效成分，同时他们的含量也间接反映原材料中青蒿和辣蓼占的比重。青蒿和辣蓼在“六神曲”中的比重对其成品品质具有一定的主导作用，青蒿素、

7、芦丁和槲皮素在“六神曲”中的含量可以作为“六神曲”质量评价的依据。本文结果，为“六神曲”的质量控制和评价提供了依据。4，建立了基于HPLC的“六神曲”质量评价体系本文通过建立八个不同产地“六神曲”色谱指纹图谱对“六神曲”进行整体质量评价，通过“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A）”进行分析，共得到9个有效峰。通过对相似度的比较，各地“六神曲”整体质量差异较大，其中安徽亳州和四川成都两个产地在相似度较为接近大于0.8，且两个产地产品质量有一定的保障。其他产地均已作坊生产居多，再加上目前全国各地“六神曲”质量标准不统一，配方不尽相同。各地发酵环境及生产

8、条件具有差异，导致各地“六神曲”质量差异很大。9个有效峰的含量可以