色谱指纹图谱评价

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1、中药色谱指纹图谱操作规范与评价探讨祝晨蔯博士教授广州中医药大学中药学院zhuchenchen@vip.sina.com2021/10/71主要内容◆色谱指纹图谱的缘起、属性、特点和作用◆中药色谱指纹图谱方法学◆中药色谱指纹图谱试验的规范化◆中药色谱指纹图谱的定性评价方法◆应用实践2021/10/72◆色谱指纹图谱的缘起、属性、特点和作用2021/10/73中药质量控制现状《中国药典》关于药材所收录的信息【浸出物】【炮制】【性味与归经】【名称】【性状】【鉴别】【检查】【含量测定】【功能与主治】【用法与用量】【贮藏】【来源】宏观特征鉴别微

2、观特征鉴别生药学动物分类学植物分类学矿物学微生物分类学药物分析学经验鉴别定性鉴别含量测定指标成分、对照药材2021/10/74齐墩果酸、熊果酸、大黄酸、槲皮素、小檗碱目前中药质量控制的局限●缺乏化学对照品●化学对照品缺乏专属性●物质群体间的量化特征无法体现黄柏、黄连——小檗碱、巴马亭的比例人参、西洋参或三七——几种人参皂苷的比例●中药整体的用药的特色无法体现2021/10/75中药色谱指纹图谱的提出●中药依赖其所含的多种化学成份发挥疗效●任何单一的活性成份或指标成份都难以有效地评价中药的真伪优劣●利用现代分析技术分析不同中（成）药的整体

3、特征以提高鉴别的准确性——色谱指纹图谱分析（ChromatographicFingerprintAnalysis）——梁逸增（中南大学）2021/10/76中药色谱指纹图谱的特点及属性中药指纹图谱同传统鉴别方法的区别在于：它不是从一个“点”，而是从一个二维的“面”（一个在特定条件下的完整色谱的整体特征信息）来鉴别真伪，同时在定量操作的前提下，得到“量”方面的信息还可以估量待测样品之间总体量的差别，从而从量的角度给以动态的质量评价。色谱指纹图谱不强调个体的绝对唯一性，而强调统一药材群体的相似性，及物种群体内的唯一性2021/10/77中药

4、色谱指纹图谱的特点及属性整体性模糊性对照样品与待测样品指纹图谱的相似性，而不是完全相同比较色谱的“完整面貌”，在不同环境的样品色谱中搜索和提取与该药材指纹图谱“面貌”相关的特征，加以区别因此，中药色谱指纹图谱强调的是准确的辨认，而不是精确的计算2021/10/78◆中药色谱指纹图谱方法学2021/10/79柱色谱ColumnChromatography平面色谱PlanarChromatography液相色谱LiquidChromatography(LC)气相色谱GasChromatography(GC)薄层色谱ThinLayerChro

5、matography(TLC)毛细管电泳CapillaryElectrophoresis（CE）2021/10/710反相高效液相色谱(RP-HPLC)ReversedPhaseHighPerformanceLiquidChromatography●适用范围广●分离性能好●分析速度快●流动相选择范围宽●灵敏度高●色谱柱可多次重复使用●流出组分可以收集●采用多种检测器，可同时获取保留值信息和化合物的光谱、值谱信息对较为复杂的色谱实验条件要求比较苛刻，由此带来不同实验室之间重现性的难度增大2021/10/711薄层色谱ThinLayerCh

6、romatography(TLC)●可在同板同时分析多达18个样品，时效高●所用的是正相展开剂，其组成变化灵活，可适应多种成分的分离●离线操作，即可直观比较图谱，又可扫描得到轮廓图和处理数据●占机时间短●具有色彩参数，可获得色彩丰富的色谱图像，直观性强；同时辅以功能团显色剂还可提示成分的类别，提高鉴别的专属性。●展距局限在10cm~20cm，‘柱效’相对较低，对复杂组分不提高分离度则难以提取指纹特征的药材受到限制。●开放系统，对环境温度、相对湿度要求较高2021/10/712气相色谱GasChromatography(GC)●分离效能高

7、●分析速度快●适用于植物的挥发油成分及其它易挥发性成分或可转化为可挥发的成分测定●可提供保留值信息，与质谱联用，还可提供更丰富的化学结构信息分辨率高，得到的色谱组份非常复杂，尤其是含挥发油药材，单萜类成分组成很不稳定，样品间差异可能很大，处理数据和判别相似度时一定程度的取舍毛细管电泳CapillaryElectrophoresis●分离效能高●分析速度快●高分辨率●可与紫外、荧光、电化学、质谱、拉曼光谱等联用，可提供更丰富的化学结构信息2021/10/713◆中药色谱指纹图谱试验的规范化2021/10/714中药指纹图谱的建立指纹图的获

8、取方法验证指纹图的校验和复核中药材指纹图谱饮片指纹图谱中药提取物指纹图谱中药生产中间产品指纹图谱中药各类制剂和相关产品指纹图谱中药指纹图谱2021/10/715指纹图谱的获取指纹图谱建立和辨识指纹图谱试验研