文昌鱼抗菌肽基因的鉴定和功能研究

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时间:2019-03-20

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1、霉呼尚斯7义々OCEANUNIVERSUYOFCHINA硕±学位论文MASTE民DISSERTATION论文题目=文昌鱼抗菌化基因的鉴定和功能研究Identificationandbioactivityofantimicrobialetidespp英文题目:inamioxusrflHc//f//ph公?〇5o口z幻幻po7cw口?■/作者;刘浩涵指导教师:张±理教授汲广东讲师学位类别;全日制学术学位专业名称;海洋生物学研究方向;进化与发育rri!一,■?—'T一,.tI■

2、.—-—■―一-—-----7-::1::二^二TT-.文片化抗茜肋整时的签志和功能測巧^心此论文献给我的导师张±摧教授谨1、汲广东老师、我的家人及所有关爱我的朋友!刘浩涵I文化抗齒阮基内的鉴古巧劝能巧巧文昌鱼抗菌狀基因的鉴定和功能研究Iden村flea村onandbioactivityofantimicrobialetidesinamhioxusBranchiostomaaonicumpppjp心'々学仿论义答辩曰期:養(—指导教师签宇:瓜^省奇私I巧'笞辩委员会成员签字:磬

3、文昌唐抗盛胀基内的鉴定和功能硏巧独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加W标注和致谢的地方外,论文中不包含其。据我所知他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得(注=如没有其他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使一用过的材料。与我同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名字日期守^月/日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留,、使用学位论文的规定并同意W下事项:1、学校有权保留并向国家有关部口或机构

4、送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。'2、学校可W将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印‘4、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学中’’CNK国学术期刊(光盘版)电子杂志社用于出版和编入I《中罔知识资源总库》,授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密的学位论文在解密后适用本授权书).学輸义\轉容容.导师签字:(川禾訓咬签字/日签字日期年/月/日日期年^月5文昌鱼抗瞒肋基因的鉴定和巧能硏究文昌鱼抗菌肋基因的鉴定和功能研究摘要文昌鱼是一种重

5、要的模式生物,被认为是从无脊椎动物到脊椎动物间的过渡物种,有着重要的进化地位,。抗菌化是构成生物体先天性免疫的重要组成成分能快速高效杀死入侵病原体,也是目前应对由于抗生素滥用所引起的细菌抗药性一A问题的重要替代途径之。本文W青岛文昌鱼为研究对象,成功从其cDN文一库中鉴定出种新型抗菌肤基因,并对组织分布,W及编码的成熟肋的功能及其抑菌机制进行研究。本文依据进化关系较近物种间抗菌肋基因所编码的前体化的信号化序列高''一-(MjHFIAP1保守性这特点,W盲Mynneg/Mfzwora)抗菌化的信号肢为检索一,通过生物信息学分析条件,在佛罗里达文昌鱼数据库

6、中确定了条预测的抗菌化基因序列,并从青岛文昌鱼cDNA文库中成功克隆出目标抗菌版基因巧amp/的完整ORF,化学合成其编码的成熟抗苗化多肋段m巧AMP1,研究了mBjAMPl的抑菌功能,并对其抑菌机制和溶血性、细胞毒性进行了探索。通过生物信息学分析一,我们确定了青岛文昌鱼的条抗菌化目标序列口mp/PC民及RACE技术成功克隆出该基因完整ORF。组织分布表明,巧,采用公知主要在肠、魄、肝盲囊、肌肉、脊索中火量表达,而在精巢和巧巢中表达较少。经LPS/LTA处理后,其表达量在脊索、肌肉、肝盲囊中的表达量显著升高,表明巧ampi可能参与到了文昌鱼的免疫反应之中

7、。公ORF长294b一97知的完整p,编码条包含个氨基酸残基的多化链;一经分析,该多肤链氨基端的前24个氨基酸残基构成信号肤,中间为段阴离子一7576富集区,接基端为阳离子富集区。经预测,成熟抗茜化为位于民R双碱性氨基酸残基剪切位点之后的由21个氨基酸残基构成的多狀段,并命名为mBAMPl,其分子质量为2.5KDa,等电点为11.6,疏水性氨基酸残基比例为j38%,静电荷为+6,含有两段a螺旋结构。采用化

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