前列腺癌免疫化学研究

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5、教育网免费论文医学论文基础医学论文正文3edu教育网,百万资源,完全免费,无需注册,天天更新！前列腺癌免疫化学研究前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,在欧美国家发病率最高。我国前列腺癌发病率虽远低于西方国家,但也呈现逐年增长趋势。我们先前在世界上首次在体内和体外实验报道了过表达NDRG3可以增加前列腺癌细胞的致癌潜能,尤为重要的是利用基因芯片和RT-PCR技术检测到NDRG3的过表达还可以明显上调前列腺癌细胞和前列腺间质细胞小趋化因子蛋白家族成员CXCL1、CXCL3和CXCL5的表达。一

6、个基因能够同时改变一个家族多个成员的表达,并且有如此明显的效果,这充分说明NDRG3和趋化因子CXC亚家族存在着某种非常密切的联系,并且NDRG3可能通过其下游分子CXC亚家族参与前列腺癌的发生与演进过程。本实验拟开展CXCL5在前列腺癌组织和良性前列腺增生组织(benignproststichyperplasia,BPH)表达的研究,并可将CXCL5与其上游分子NDRG3的功能联系在一起,从而为研究该信号通路在前列腺癌发生、发展中的作用提供更多的理论依据。1材料与方法1.1实验标本的收集处理收集本市

7、2009~2011年间各医院行手术切除的前列腺标本,所有样本均用体积分数4%多聚甲醛固定后经石蜡包埋用于后续实验。1.2试剂与仪器小鼠抗CXCL5单克隆抗体为加拿大SantaCruz公司产品;SABC免疫组织化学试剂盒为武汉博士得生物工程有限公司产品;DAB为武汉博士得生物工程有限公司产品;TE2000荧光倒置显微镜为日本尼康公司产品。1.3免疫组织化学检测前列腺组织中CXCL5蛋白表达石蜡包埋组织常规脱蜡入水;体积分数3%H2O2室温处理10min,以消除内源性过氧化物酶的活性,PBS(pH7.4)

8、清洗2min×3次;将切片放入一定量的10mmol/L柠檬酸盐缓冲液中(pH6.0)进行抗原修复,微波加热至沸腾后离开热源,反复4次,室温放置自然冷却,PBS(pH7.4)清洗5min×3次;滴加体积分数0.05%的BSA封闭液室温封闭20min,甩掉封闭液,不洗;滴加小鼠抗CXCL5单克隆抗体(稀释比例1∶50),37℃6----------------------------------------------------精品文档值得收藏------