去细胞脊髓支架复合骨髓基质干细胞移植及tsc-1基因特异性敲除促进脊髓损伤修复的实验研究

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1、分类号密级ＵＤＣ编号？似Ｉ似嫁博ｉ学位论文去细胞脊髓支架复合骨髓基质干细胞移植及ＴＳＣ－１基因特异性敲除促进替髓损伤修复的实验研究ＳｔｕｄｙＯｎＡｃｅ化１批ＳｐｉｎａｌＣｏｒｄＳｃａｆｏｌｄＳｅｅｄｅｄＷ地ＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＳｔｒｏｍａｌＣｅｌｌｓＡｎｄＴＳＣ－１ｄｅｌｅｔｉｏｎｅｎｈａｎｃｅｓ出ｅｒｅｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙ＾ｆｂｌｌｏｗｉｎｇＡｄｕｌｔＳｐｉｎａｌＣｏｒｄＩｎｊｕｒｙ陈建导师姓名金大地自瞒专业名外科学（骨外科）培养类型论文提父日期２０１５年３

2、月２７日－南方医科大学２０１２级博±学位论文第一部分去细胞脊髓支架复合骨髓基质干细胞治巧大鼠脊髓损伤的研究ＳｔｕｄＯｎＡｃｅｌｌｕｌａｒＳｉｎａｌＣｏｒｄＳｃａｆｆｏｌｄＳｅｅｄｅｄｗｉｔｈｙｐＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＳｔｒｏｍａｌＣｅｌｌｓＴｒｅａｔｍｅｎｔＦｏｒＳｐｉｎａｌＣｏｒｄＩｎｕｒｅｄＩｎＲａｔｓｊ第二部分ＴＳＣ－１基因敲除对脊髓损伤局部微血管的影响－１ｄｅｓｃｕａｒｚａｏｎａｂＴＳＣｌｅｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｔｈｅｒｅｖａｌｉｔｉｉｌｉｔｙｆｏｌｌｏｗｉｎｇＡｄｕｌｔＳｉ打ａｌＣｏｒｄＩ

3、ｎｕｒｐｊｙ课题来源：国家自然基金资助（３０９７３０３６）学位申请人陈建导师姑义金大地白晚春专业若称外科学（骨外科）培养类型学术型培养层次博壬所在学院第五师属医院２０１５年３月２７日广州博壬学位论文第一部分去细胞脊髓支架复合骨髓基质干细胞治疗大鼠脊髓损伤的研究博壬研究生：陳建指导教师：金大地教授白晓春教授搞要一、研究背景与目的脊髓损伤常导致脊髓损伤节段Ｗ下的运动感觉功能的丧失，对患者进行康．。鉴于此复治疗，大量的学者采用基于，给枉会和患者的家庭带来巨大的负担干细胞移植治疗脊髓损伤进行了尝试，部分研究取

4、得Ｔ不错的实验效果，对损伤脊髓的康复发挥明显的促进作用。多种人工合成材料、天然材料被用于合成修复脊髓损伤的支架，并复合各种干细胞修复脊髓损伤。基于人工合成材料合成的支架具有可降解性，极好的机械强度；，能作为脊髓损伤局部的运输工具等优点但这些支架也有不可忽视的缺点，：如支架降解可使移植支架的局部环境有害降解产物聚集改变损伤局部微环境，导致组织细胞的死亡（包括移植入体内的干细胞）。那么天然材料合成的支架是否没有这些缺点呢？已有的研究结果显示，基于天然材料合成的用于治疗脊髓损伤的支架有很好的吸附粘连性，降解产物不会改变损伤部位的微环境然而这些天然材料合成的支架也具

5、有如下问题：①物理支撑强度不高，：②与损伤脊髓修复速度不匹配的降解率。因此，基于人工材料及天然材料合成支架都必须改进方能用于脊髓损伤的修复。目前有许多报道将去细胞组织支架用于脊髓损伤修复：，去细胞组织支架拥有很多优良的天然属性①Ｈ维立体空，，隙结构，②降解产物无毒性③柔软的质地④与损伤脊髓修复同步的降解率Ｉ中文摘要等优点，完全弥补了合成材料的不足；去细胞组织支架能很好的模拟细胞外基质，有很好的潜能促进神经的再生及促进功能的恢复。由于相当容易获取Ｗ及较低的免疫抗原性，ＢＭＳＣｓ是最好的治疗脊髓损一伤的干细胞之。使用骨髓基质干细胞修复脊髓损伤是因为这些细

6、胞有潜能分化为神经组织来替损伤部位调亡的脊髓组织。并且这些细胞移植入体内后还可Ｗ在损伤部位释放出大量的神经生长相关的因子，运些因子是神经组织的保护。剂，同时还能促进神经轴突的发芽再生这种基于干细胞移植的治疗策略需要移植入损伤部位大量的干细胞，并提高干细胞在体内的存活率，才能有效治疗脊髓损伤。本实验中，我们采用去细胞脊髓支架复合骨髓基质干细胞治疗脊髓损伤，我们通过对大鼠半切损伤模型移植去细施脊髓支架及ＢＭＳＣｓ复合体，观察其是否能够保护大鼠损伤的神经组织及轴突，并促进脊髓损伤大鼠运动功能康复的作用。二、研究嫌１、骨髓基质干细胞的增值与鉴定。２、去细

7、胞脊髓支架的制作。大鼠，麻醉后１０％水合氯酸６０ｍｌＡ（；ｇ）取新°４ＣＰＢＳＴｉｔ鲜胸段脊髓置于溶液中。对脊髓的萃取参考已有文献：脊髓通过ｒｏｎＸ－ｌＯＯＡｍｒｅｓｃｏ和ｓｏｄｉｕｍｄｅｏｘｃｈｏｌａｔｅＡｍｒｅｓｃｏ萃取两次，０．０１％ＰＢＳ溶液清（）ｙ（）１。洗Ｈ遍，每次小时冻干，福照灭菌备用。３、骨髓基质干细胞标记ＢｒＤＵ合并去细胞支架共培养。４、模型的制