新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中smad3及ppar-γ的蛋白和mrna表达及罗格列酮的干预作用

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1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文论文题目新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中Smad3及PPAR-j蛋白和mRNA表达及罗格列酮的干预作用研究生姓名李春杰肖志辉教授专业名称—一儿科学研究方向新生儿论文提交日期2015年3月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人

2、承担本声明的法律责任。论文作者签名：妙也曰期：y苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年—月解密后

3、适用本规定。非涉密论文口少�1论文作者签名：^日期：新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中Smad3及PPAR-γ的蛋白和mRNA表达及罗格列酮的干预作用中文摘要目的:选择新生大鼠建立急性高氧性的肺损伤模型并使用罗格列酮进行干预且和正常新生大鼠进行对比：1.观察与比较各实验组动物其一般情况以及肺组织的病理改变；2.探究各实验组的肺组织内Smad3及PPAR-γ表达的变化，从而探讨Smad3及PPAR-γ于急性高氧性的肺损伤其发病机制中的作用；3.探讨罗格列酮是否发挥对急性高氧性的肺损伤起到的保护作用，对临床防治新生儿高氧性肺损伤来说可以提供理论依据

4、。方法：将108只出生满48小时的新生SD大鼠（雌雄均可），按照随机原则分为三组：I组--空气组；II组--高氧组（高氧+生理盐水）；III组--罗格列酮干预组（高氧+罗格列酮）；I组新生大鼠置于常压空气中饲养。II组、III组新生大鼠置于氧浓度维持在90-95%的氧箱中饲养。III组于实验第一天起每日灌喂罗格列酮(3mg/kg)。I组与II组于实验第一天起每日灌喂等量生理盐水。每组按实验时间点分为1天、3天、7天三个亚组，每组于各实验时间点分别随机选取12只实验鼠，处死后取材并完成下述指标的检测：（1）肺泡灌洗液中的总蛋白含量；（2）选

5、取左肺并称其湿重和干重，算出肺湿/干重比；（3）观察肺组织病理学情况：选取右上肺对其进行病理切片以观察肺组织的病理改变；（4）肺组织Smad3及PPAR-γ蛋白及mRNA的含量测定：选取肺组织匀浆并提取蛋白，采用westernblotting法对其蛋白含量分别加以测定；另选取取部分肺组织进行RNA提取，采用RT-PCR法对其mRNA含量分别进行测定。结果：1.各组实验动物一般情况观察：I组中的实验动物精神状态佳，皮毛光泽正常，饮食正常，活动灵活，无死亡。II组中的实验动物高氧暴露1天时精神状态好，I皮毛光泽可，进食可，离氧后无呼吸困难表现

6、。高氧暴露三天后实验动物精神尚可，皮毛光泽较前变差，进食较差，脱离氧气后呼吸频率加快。高氧暴露七天时实验动物精神萎靡，皮毛光泽差，少吃少动，离氧后出现呼吸急促，个别死亡。III组的实验动物一般情况较II组有改善。2.肺组织病理学改变：I组大鼠各时相肺组织结构规整，肺泡大小均一、肺泡腔内无炎症反应。II组实验动物于高氧暴露1天时可见肺泡结构完整，肺泡内可见少许红细胞，无明显渗出；3天后可见肺血管扩张充血，肺泡内可见红细胞、炎症细胞浸润，肺间质水肿，肺间隔断裂，肺泡腔扩大；7天时则肺组织出现明显液体渗出及炎症细胞浸润，肺泡内出血，肺间质水肿明

7、显加重，部分肺间隔增宽变形，结构紊乱。III组的肺组织病理改变，肺泡腔内液体渗出，红细胞、炎性细胞浸润较II组明显减轻。3.肺组织湿/干重比（W/D）：实验1天时，各组实验动物的肺组织W/D无明显差异（P＞0.05）。实验3天、7天时，II组实验动物的肺组织W/D较Ⅰ组有升高（P＜0.01），III组实验动物的肺组织W/D较II组有降低（P＜0.01）。4.支气管肺泡灌洗液（BLAF）中总蛋白（TP）含量测定：实验1天时，三组实验动物BLAF中TP含量无明显差异（P＞0.05）。而实验3天及7天时，II组实验动物的BLAF中TP含量明显高

8、于Ⅰ组(P＜0.01)，而III组的BLAF中TP含量则明显低于II组(P＜0.01)。5.肺组织中Smad3及PPAR-γ蛋白表达水平的变化：westernblotting检测结果表明：各组