大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化

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1、17SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文s1!ii^J2X论文题目x•qj脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经—_细胞自噬水平的动态变化研究生姓名钱会银指导教师姓名刘励军专业名称急诊医学研究方向心肺脑复苏论文提交日期2015年3月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法

2、律责任。论文作者签名：巧M曰期:々苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年—月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名

3、••外、,曰期:A/r,导师签名：/'‘日期：中文摘要大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化中文摘要目的：1、按照Utstein模式建立窒息法心脏骤停模型和致颤法心脏骤停模型，比较两组模型的差异并观察大鼠自主循环恢复后24h组织病理学变化特点。2、观察大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化情况，探讨心肺复苏后自噬的发生及其变化规律。方法：1、分别采用窒息法和致颤法制备大鼠心脏骤停模型，比较两组大鼠在诱发心脏骤停时间、神经功能缺损评分、心脏骤停心电图变化、复苏

4、成功率及自主循环恢复后24h存活率的差异；并观察大鼠自主循环恢复后24h脑皮质及海马组织病理学变化特点。2、采用经皮电刺激心外膜法建立大鼠心脏骤停模型（致颤法），利用随机数字法将大鼠分为7组：空白对照组仅进行麻醉、气管插管、动静脉置管等操作，不诱发心脏骤停（0h组）。采用致颤法制备大鼠心脏骤停复苏模型，在恢复自主循环后3h，6h，12h，24h，48h，72h各时间点分别充分麻醉后处死大鼠，取材，透射电镜下观察脑组织自噬超微结构变化，采用Western-blot、免疫组化检测脑皮质及海马神经细胞自噬相关蛋白Beclin-1、LC3II的变化。结果：1、窒息组从

5、窒息开始到出现心脏骤停的间隔时间为292.7±51.5sec，而致颤组从释放交流电至出现心脏骤停的间隔时间为2.5±1.2sec，致颤组诱导心脏骤停时间较窒息组时间明显缩短（P<0.05）；窒息组心电图表现为心电静止5例，无脉搏电活动10例，共15例，而致颤组心电图表现为室颤6例，心电静止7例，无脉搏电活动2例，共15例；窒息组复苏成功6例，自主循环恢复后24h存活4例，致颤组复苏成功9例，自主循环恢复后24h存活6例；采用神经功能缺损评分，在12h、24h两个时间IV点时窒息组评分明显低于致颤组（P<0.05）；HE染色发现，窒息组较致颤组的神经组织损害病理

6、变化更加明显。2、透射电镜下观察致颤法心脏骤停复苏模型发现，自噬体在6h组开始出现，24h组达高峰，48h组逐渐减少。免疫印迹和免疫组化分别检测脑皮质及海马神经细胞自噬相关蛋白Beclin-1、LC3II含量，与空白对照组（0h）相比，恢复自主循环后上述两种蛋白表达逐渐升高，24h时达峰值，48h及72h时又有所下降。结论：1、心脏骤停模型的建立中，致颤法较窒息法诱导心脏骤停所需时间明显缩短，其心脏骤停的心电图类型也更类似于临床，并且心肺复苏成功率及24h存活率也高于窒息法。故此，致颤法是心肺复苏较理想的实验模型。2、大鼠心脏骤停心肺复苏后自噬被激活，并持续一

7、定的时间，提示自噬在大鼠心脏骤停后脑损害中可能具有一定的作用。关键词：心脏骤停；心肺复苏；脑皮质；海马；自噬；Beclin-1；LC3II作者：钱会银指导老师：刘励军教授V英文摘要大鼠心脏骤停心肺复苏后脑皮质及海马神经细胞自噬水平的动态变化ThedynamicchangeofautophagyinthetissueofcerebralcortexandhippocampusfollowingcardiacarrestinratsAbstractObjective1.Tocomparecardiacarrestmodelsinducedbyasphyxiatio

8、nandinducedbytransc