基于丝素蛋白的反蛋白石结构三维细胞支架的构建研究

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1、？来兩：ｋ參硕±学位论文＝基于丝素蛋白的反蛋白石结构维细胞支架的构建研究专业名觀生物医学工程研究生牲名：汤栋梁导师姓名：顾忠泽教授赵远锦副教授ＦＡＢＲＩＣ乂ＴＩＯＮＯＦ３ＤＳＣＡＦＦＯＬＤＷＩＴＨＩＮＶＥＲＳＥＯＰＡＬＳＴＲＵＣＴＵＲＥＢ乂ＳＥＤＯＮＳＩＬＫＦ此ＲＯＩＮＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒ化ｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＥｎｇｉｎｅｅ

2、ｒｉｎｇＢＹＴＡＮＧＤｏｎｌｉａｎｇｇＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＧＵＺｈｏｎｚｅｇＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＺＨＡＯＹｕａｎｉｎｊＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｌｏｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆ＭｅｄｉｃａｌＥｎｉｎｅｅｒｉｎｇｇｇｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔＮａｎｉｎＣｈｉＳｏｕ．Ｒ．ｎａｙ，ｊｇ，ＰＤｅｃ．２０１４东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指哥下进行的硏究工作及取得的研究成果，，

3、。尽我所知除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构一的学位或证书而使用过的材料。与我同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＇々主＇Ｂ刈．委！研究生签名：降衙皆期：东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相

4、一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ公布包括刊登论文的全部或部分内容。论文的公布（（包括）刊登）授权东南大学研究生院办理。一：冻格索导师答名．研究生签名：日期：唯Ｉｊｏ＾基于丝素蛋白的反蛋白石结构Ｈ维细胞支架的构建研究巧要蚕丝是一种古老的天然材料，被人利用的历史已经有几千年。丝素蛋白是从一蚕丝中提取出来的种天然蛋白，由１８种氨基酸紀成，其中富含的甘氨酸、丙－－Ｇ－Ａ－Ａ－－氨酸、丝氨酸多ＷｌｙｌａＧｌｙｌａＳｅｒ重复序列的多肤形式存

5、在。丝素蛋白被用作手术缝合材料应用于生物医学领域也已有数百年历史，其优异的生物相容性，生物可降解性，良好的机械性能和光学性能在目前的高科技研究平台下有了更广阔的应用空间。在治疗组织器官损伤方面，组织工程是最具前景的方式，它能够避免传统治疗方法中会出现的免疫排斥和供体短缺等问题。在组织工程的多个重点问题当中，细胞支架的结构和性质是在材料科学和生物医学领域最被广泛研究的。细胞支架的结构关系到细胞的粘附，细胞的增殖，营养物质的转移和代谢产物的排出等多一个方面。丝素蛋白具有生

6、物相容性和生物可降解性，是种理想的细胞支架材料，一我们希望将空素蛋白应用于细胞支架中，制备成种具有良好反蛋白石结构的Ｈ维细胞支架。本论文主要研究了一种基于丝素蛋白的反蛋白石结构三维细胞支架的有效制备方法：，具体工作如下１．丝素蛋白的提取及凝胶化试验：我们从生蚕虽中提取丝素蛋白，并对比了不同提取体系的特点；将提取的丝素蛋白制备成包括水凝胶、海绵、纳米巧维薄膜等不同形式，并评估Ｈ种不同形式丝素蛋白材料的不同性质。２．丝素蛋白反蛋白石结构Ｈ维细胞支架的构建；我们利用自制的微

7、流控装置制备了Ｈ种材料的单分散性模板微球；通过对比确定聚己内酷材料为制备模板微球的最佳方案，并将其模板微球排列成密堆积结构的模板团聚体；将丝素蛋白浸淘到模板团聚体空隙中复制模板结构，最后将模板微球除去即可得到反蛋白石结构的丝素蛋白Ｈ维细胞支架。３．丝素蛋白细胞支架的细胞培养试验：我们研究了丝素蛋白水凝胶材料和海绵材料在细胞培养试验中的优劣，认为海绵形式更好的机械性能使之相较于水凝胶形式更具优势；将丝素蛋白海绵的反蛋白石结构兰维细胞支架应用于细胞试验，利用倒置巧光显微镜

8、等方式表征了细胞的粘附和生长情况，并用ＭＴＴ法评估了Ｉ东南大学硕±学位絶文细胞的活性和增殖情况。关巧词：丝素蛋白；微流控装置；兰维细胞支架；反蛋白石结构；细胞培养。ＡｂｓｔｒａｃｔＦＡＢＲＩＣ乂ＴＩＯＮＯＦ３ＤＳＣＡＦＦＯＬＤＷＩＴＨＩＮＶＥＲＳＥＯＰＡＬＳＴＲＵＣＴＵＲＥＢ乂ＳＥＤＯＮＳ比ＫＦＩＢＲＯＩＮＡｂｓｔｒａｃｔＳＵｋｒｒｓｉｓａｎａｎｃｉｅｎｔｍａｔｅｒｉａｌｗｈｉｃｈｈａｓ