人食管上皮细胞在多孔丝素蛋白支架上体外培养构建组织工程化食管的实验研究

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1、学校代码：10246学号：09211220058复旦大学硕士学位论文人食管上皮细胞在多孔丝素蛋白支架上体外培养构建组织工程化食管的实验研究院系：华山医院专业：临床医学（胸外）姓名：祝巧良导师：陈志明副教授导师小组成员：庞烈文副教授马勤运主治陈刚主治完成日期:2012年4月5日复n大学硕士学位论文目录目录一、中文摘要1二、英文摘要2三、lEt41?前言42.材料与方法63?结果94.讨&20S.itit246?参考文献25四、综述28五、致谢45―复旦人学硕士学位论文中文

2、摘要人食管上皮细胞在多孔丝素蛋白支架上体外培养构建组织工程化食管的实验研宄摘要目的：研究食管上皮细胞在多孔丝素蛋白支架上的粘附和生长情况，观察人食管上皮细胞与丝素蛋白支架的生物相容性，探索以丝素蛋白支架为基质构建组织工程化食管的可行性。方法：体外分离、培养、扩增人正常食管上皮细胞，并以一定数量接种于丝素蛋白支架上，在体外持续培养，通过组织学及扫描电镜观察食管上皮细胞在体外的增殖与分化情况以及细胞与丝素蛋白支架的生物相容性。结果：分离培养的人食管上皮细胞呈铺路石样，体外可大量扩增，细胞角蛋白抗体免疫组织化学染色

3、阳性，体外培养可见食管上皮细胞在支架上粘附、生长良好，持续培养仍可保持食管上皮特性。结论：酶消化法适合食管上皮细胞的分离，所得细胞成分较纯，丝素蛋白支架有良好的生物相容性和细胞粘附性，无细胞毒性，适于食管上皮细胞的粘附生长，可作为组织工程食管的支架材料。关键词：食管；丝素蛋白；体外培养；组织工程中图分类号：R655.4球厂复旦大学硕士学位论文英文摘耍Experimentalresearchonconstructionoftissueengineeringesophagusmodelwithcultureofh

4、umannormalesophagealepithelialcellsonporoussilkfibroinscaffoldinvitroABSTRACTOBJECTIVE:Toverifytheadhesionandgrowthabilityofhumanesophagealepithelialcells(EECs)onporoussilkfibroinscaffold,toobservethebiocompatibilityofhumanesophagealepithelialcellswithporou

5、ssilkfibroinscaffold，andtoexplorethepotentialsignificancepossibilityofporoussilkfibroinasanextracellularmatrixmaterialinesophagustissueengineering.METHODS:Humannormalesophagealepithelialcellswereisolated,proliferatedinvitro，andthenseededandculturedonporouss

6、ilkfibroinscaffoldwithanappropriateconcentration.Theproliferationanddifferentiationpatternofesophagealepithelialcellsinvitroandthebiocompatibilityofgrafting-graftedcompositewerestudiedbyhistologicalandscanningelectronmicroscopicexaminations.RESULT；TheeelIsd

7、isplayedacobblestone-shapedmorphologythatwascharacteristicoftheepithelialeelIsandwerestainedtobepositiveforcytokeratin,whichindicatedthatwasEECs.TheEECswerewelldistributedandadheredtotheporoussilkfibroinscaffold,andmaintainedtheircharacteristicsthroughoutth

8、ecultureperiod.CONCLUSION:Sequentialenzymedigestionisfitforhumanesophagealepithelialcellisolation.TheporoussilkfibroinscaffoldwithitsporousstructurewashighlybiocompatibleandnoncytotoxicasdeterminedbyEE