垂体泌乳素腺瘤临床与基础相关性研究

垂体泌乳素腺瘤临床与基础相关性研究

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1、^京诚和皆f從中固聲3刮養獻博女研究生学位论文北京协和医学院研究生院北京协和运学院博±学位论文学校代码:10023学号:B2013001071博i学位论文垂体泌乳素腺瘤临床与基础相关性研究ClinicalandBasicResearchonProlactinomas.所院:北京协和医院姓名:刘阳指导教师:王任直教授导师小组:杨义教授马文斌教授幸兵教授姚勇教授学科专业:外科学(神外)学位类型:专业学位研究方向:垂体腺瘤临床与基础研

2、巧完成日期:2015年4月北京协和医学院博±学位抢文目录10录缩略词1摘要2Abstract4一第部分14岁W下儿童垂体泌乳素腺瘤相关研巧7前B7材料与方法7一1.患者般资料及研究方法72.基本标准及定义83.随诊标准84.统计学分析8实验结果81.临床表现812.内分泌检查和影像学检查结果03.治疗和随诊10W13论参考文献17第二部分通过激活AMPK信号通路对滨隐亭耐药的垂体泌乳素腺

3、瘤治疗的研巧21前胃21材料和方法221.实验材料221.1化学药品22、试剂和仪器①药品:22②试剂盒22離体22④引物合成23⑤其他主要试剂和材料23⑥主要仪器及设备231.2细胞系23.13实验动物231.244人垂体泌乳素腺瘤肿瘤2.实验方法242.1细胞培养,传代及冻存24-.2RNlR2A提取,转录及eatimePC25r21RNA.2.提取252.2.2逆转录2522-T3Re

4、alimePCR..252R-TmR.2.4ealiePC反应体系如下:26-2.2.5RealTimePCR应条件如下:26反1北京协和医学院博±学位论文-22.26艮eali.TmePCR数据分析72.3Westernblotting2727.3.1细胞息蛋白提取及蛋白浓度测定22.3.2ernblotin28Westg实验所用试齐!j2.3.3聚丙巧醜胺凝胶电泳282.3.4抗原抗体反应及化学发光法检测蛋白含量巧2.

5、4PRL水平Elisa方法检测细胞样品和小鼠血浆样品巧2.5组化(二步法).免疫302..5]脱蜡302.5.2消除内源性过氧化物酶302.5.3高皮法热抗原修复3024.5.抗体杂交312.5.5DAB显色,复染312.5.6封片31..257统计31-2IT1.6AnnexinVFC法检测细胞调亡32A1对于MMQ细胞系(悬浮细胞):312(:.6.2.对于GH3细胞系贴壁细胞)322-CCK832.7实验2.7.1

6、MMQ细胞系和GH3细胞系标准曲线制作32.27.2MMQ细胞和GH3细胞加药后増殖改变检测332U.8Ed细胞增殖实验332.9裸鼠体内抗肿瘤实验342.1035统计分析5实验结果31.漠隐亭治疗垂体泌乳素腺瘤的过程中需要AMPK通路的介导351.1验证人泌乳素腺瘤肿瘤标本中D2R、ER表达和AMPK激活程度分析352.AMPK信号通路的激活可W通过下调ER的表达抑制肿瘤增殖、促进调亡,并通过上调D2R表达増加漠隐亭敏感性。2过程中MM和GH3细胞

7、AMPK信号通路的改.1漠隐亭治疗Q细胞变3722AICA民iMMQ和GH3细胞系AMPK信号通.和Me佈rmn可激活m382.3AMPK信号通路的激活可W下调ERa和ER的表达39P2.4AMPK信号通路激活抑制MMQ和GH3细胞的增殖4125AMPKMMQGH3细胞的调亡....信号通路的激活可W促进、....巧26AMPK^上32R.信号通路的激活可^^调MMQ、GH细胞D的表达442.7AMPK信号通路激活药物可协同漠隐亭抑制垂体泌乳素腺瘤细胞P

8、RL水¥45.3动物水平实验463.1动物移植瘤模型的建立463.22Metformin可W降低小鼠ERa和E邸的表达,可能会增加DR2北京协和医学院博±学位论文的表达:47■im:15参考文献54一文献综述如文献综述二妨致谢74个人简773北京协和医学院博±学位论文

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