同型半胱氨酸通过干扰胆固醇逆向转运促进巨噬细胞泡沫化

《同型半胱氨酸通过干扰胆固醇逆向转运促进巨噬细胞泡沫化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R5单位代码：10752密级：公开学号：201200198宁夏医科大学硕士研究生学位论文同型半胱氨酸通过干扰胆固醇逆向转运促进巨噬细胞泡沫化Homocysteinepromotesmacrophagefoamcellformationbyinterruptingreversecholesteroltransport学位申请人：张华指导教师：贾绍斌教授申请学位门类级别：医学专业名称：心血管内科学研究方向：动脉粥样硬化发病机制所在学院：临床医学院论文完成日期：二〇一五年三月宁夏医科大学研究生学院NingxiaMedicalUniversityThesisforAp

2、plicationofMaster’sDegreeHomocysteinepromotesmacrophagefoamcellformationbyinterruptingreversecholesteroltransportStudent’sName:HuaZHANGSupervisor：Shao-binJIASubjectCategory:MedicineMajor:InternalMedicineSpecialty:PathogenesisofAtherosclerosisSchool:ClinicalMedicineDepartmentCompletionDa

3、te:Mar2015宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑逭声明：所呈交的学位论文，足个人在汙师的指导下，独立迸行研究工作所取得的成5R,无抄袭及编造行为。除文屮己经特别加以注明引用的内容外•本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均Ll在文中以明确方式标明并致谢。本人完全怠识到木声明的法律结果由本人承担•宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁a医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向旧家打关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被杳阅和借阅。本人授权宁a医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数

4、掘昧进行检索，可以釆w影印、缩印或其他复印r段保//和5丨：编本宁位论文。印以公布（包括刊登〉论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定）一_宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要同型半胱氨酸通过干扰胆固醇逆向转运促进巨噬细胞泡沫化摘要目的阐明不同浓度同型半胱氨酸对THP-1源性巨噬细胞泡沫化的影响；探讨LXRα在同型半胱氨酸引起脂代谢紊乱中的作用。方法以THP-1单核细胞作为研究对象，培养THP-1单核细胞，取对数增殖期细胞进行后续试验，先后与佛波酯（PMA）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）共同培养，成功复制试验用泡沫细胞模型，然后分别加入0、50、10

5、0、200μmol/L的Hcy，各组细胞培养24小时，其中0组为对照组（不加入Hcy）。利用油红O染色（OilRedO,ORO）检测泡沫细胞内中性脂滴蓄积情况。利用酶终点法定量测定细胞内总胆固醇（TotalCholesterol,TC）、游离胆固醇（FreeCholesterol,FC）、胆固醇酯（CholesterolEster,CE）的含量，观察不同浓度Hcy对泡沫细胞内脂质含量的影响。利用免疫细胞化学检测泡沫细胞LXRα蛋白表达，利用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RealTime-PolymeraseChainReaction,RT-PCR）测定LXRαmRNA

6、表达，观察不同浓度hcy对泡沫细胞LXRα表达的影响。结果与对照组相比较，随着Hcy浓度的增加，ORO染色结果显示，Hcy呈剂量依赖性地促进了巨噬细胞内胆固醇的聚集。实验组（hcy50、100、200μmol/L）泡沫细胞计数阳性百分率均较对照组升高（P<0.05），其中以Hcy100μmol/L组升高明显。在不同浓度Hcy干预下，泡沫细胞内TC、FC及CE含量均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。免疫细胞化学结果显示，实验组LXRα蛋白表达均低于对照组（P<0.05），其中以Hcy100μmol/L组降低最为明显。RT-PCR结果显示，与对照组相比较，实验

7、组LXRαmRNA表达下调，差异有统计学意义（P<0.05）。结论同型半胱氨酸能够引起THP-1源性巨噬细胞泡沫化程度增加，使LXRαmRNA低表达导致胆固醇逆向转运障碍是其引起脂代谢紊乱的可能机制之一。关键词同型半胱氨酸，巨噬细胞，泡沫细胞，胆固醇逆向转运，肝核受体αI宁夏医科大学硕士研究生学位论文英文摘要HomocysteinepromotesmacrophagefoamcellformationbyinterruptingreversecholesteroltransportABSTRACTObjectiveToinvestigatetheef