不同脆化阶段草鱼免疫机能的变化与调控

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1、学校代码：10264研究生学号：M120150372上海海洋大学硕士学位论文题目：不同脆化阶段草鱼免疫机能的变化与调控TheChangesandRegulationofImmune英文题目：FunctionofCtenopharyngodonidellusinDifferentCrispingPeriods专业：渔业研究方向：水产动物健康养殖姓名：张振男指导教师：谢骏(研究员)郁二蒙(助理研究员)二O一五年六月四日学位论文作者签名：上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，

2、独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，

3、在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注邹记兴华南农业大学教授主席舒琥广州大学教授委员于培松广东省水产技术推广站研究员委员郭志勋南海水产研究所研究员委员余德光珠江水产研究所研究员委员郁二蒙珠江水产研究所助理研究员秘书2015年答辩地点珠江所科技楼1楼会议室答辩日期6月4日上海海洋大学硕士学位论文不同脆化阶段草鱼免疫机能的变化与调控摘要普通草鱼(Ctenopharyngodonidellus)摄食单一饵料蚕豆(Viciafa

4、ba)120d后，可成为风味独特的脆肉鲩，目前已成为广东省中山市东升镇的特色产业，且消费范围也由广东逐渐覆盖至全国。但是，在脆肉鲩养殖生产过程中常出现的“半脆”、“过脆”和“肿身病”死亡的现象，曾一度难倒众多养殖户，至今对草鱼脆化时的生理病理变化过程仍不清楚。为此，本文首先进行肌肉脆化特性分析，再从肠道菌群组成与血清免疫酶活性、头肾与肝脏的超微结构、溶菌酶等免疫基因的定量表达3个方面，综合探讨草鱼在不同脆化阶段的生理生化状况，以期阐明脆肉鲩的免疫健康状态，进而为脆肉鲩的健康养殖提供科学的指导资料。具体研究内容如下：1.本研究首先检测草鱼肌肉脆化

5、效果，为后续脆肉鲩免疫机能的研究做准备。结果显示，脆化120d时，蚕豆组草鱼肌纤维直径比对照组减少了28.12%(P<0.01)，肌纤维密度增加了99.14%(P<0.01)。脆化120d时，蚕豆组草鱼肌肉硬度、弹性、咀嚼性、内聚性和胶黏性分别比对照组增加了39.76%(P<0.01)、37.20%(P<0.01)、92.82%(P<0.01)、30.43%(P<0.01)和68.17%(P<0.01)。实验结果发现，不同时期摄食蚕豆的草鱼肌纤维直径逐渐减小、肌纤维密度逐渐增大、肌肉硬度与弹性等逐渐增大，表明已获得不同脆化程度的脆肉鲩。2.检测

6、不同脆化阶段草鱼肠道菌群组成结构、血清酶活性及生长性能，进而衡量脆肉鲩形成过程中的生理生化变化。结果显示，60~150d蚕豆组草鱼体重均低于对照组，90~120d蚕豆组草鱼头肾体指数和肝体指数均低于对照组，150d时蚕豆组草鱼肝体指数与对照组无显著差异；蚕豆组草鱼血清碱性磷酸酶、溶菌酶和补体C3(第30天除外)活性均低于对照组的，在转投喂饲料后，3种血清酶活性均出现回升趋势；与对照组相比，蚕豆组草鱼肠道菌群多样性降低，芽胞杆菌属(Bacillus)和鲸杆菌属(Cetobacterium)等有益菌数量减少，维氏气单胞菌(Aeromonasvero

7、nii)、温和气单胞菌(Aeromonassobria)和鳗弧菌(Vibrioanguillarum)等条件致病菌数量增多。两组草鱼肠道核心菌群主要为变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和梭杆菌门(Fusobacteria)。本研究结果表明，随着脆化时间的增加，饲喂蚕豆改变草鱼肠道菌群组成、抑制血清酶I上海海洋大学硕士学位论文活性和生长性能，在脆化120d转投饲料后(蚕豆组第150d时)其肠道菌群、血清酶活性及生长性能均有所改善。3.为了探究投喂蚕豆对草鱼免疫相关组织

8、结构的影响，本研究还观察了不同脆化阶段草鱼头肾、肝脏和肠道的超微结构变化。超微结构分析结果显示，蚕豆组草鱼头肾细胞出现空泡；脆化后期头肾细胞受损，出现