plk1抑制剂volasertib联合顺铂对肝癌的抑制作用

《plk1抑制剂volasertib联合顺铂对肝癌的抑制作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：PLK1抑制剂volasertib联合顺铂对肝癌的抑制作用PLK1inhibitorvolasertibpotentlysynergizeswithcisplatininhepatocellularcarcinoma作者姓名：薛有求指导教师姓名：魏星、石智及学位、职称：博士、教授，博士、教授学科、专业名称：生物化学与分子生物学学位类型：学术学位论文提交日期：2015年06月23日论文答辩日期：2015年05月26日答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：

2、本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期：年学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大学可

3、以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：A乂十导师签名:签字日期：年G月#日签字日期:学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：通讯地址：邮编：暨南大学硕士学位论文摘要背景：肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma,HCC）占原发性肝癌的90%，是世界上发病率第六位的常见肿瘤，在由肿瘤致死的病因中位居第三。目前，在我国以及很多其他国家肝癌的发病率和死亡率仍在不断升高

4、。由于肝癌的病因以及确切的分子机制尚不明确，导致其早期诊断困难，缺乏有效的预防和治疗手段，加之肝癌患者在长期用药过程中产生的耐药，使得预后复发、转移，存活率很差。因此，进一步深入了解肝癌发生发展的分子机制，寻找新的治疗方案及诊治靶点具有重要的临床意义。PLK1(polo-likekinase1)是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，通过参与检查不同的细胞周期检查点来调控细胞周期。有研究表明，PLK1与肿瘤的发生发展有很大的关系，在许多肿瘤中都有高表达，其表达缺失可激活促凋亡途径和抑制肿瘤细胞生长。

5、目前，PLK1作为抗肿瘤药物的靶点被广泛关注，PLK1的抑制剂也层出不穷。Volasertib为PLK1的特异性抑制剂，能在体内外抑制多种肿瘤的生长。因此，对PLK1的研究以及围绕PLK1展开的新的治疗法案具有实际意义，对肿瘤的靶向治疗具有指导作用。目的：探讨PLK1抑制剂volasertib单药及联合常规化疗药顺铂(DDP,cis-Dichlorodiamineplatinum)在体内外对肝癌细胞以及肝癌移植瘤的作用及其机制研究以寻找有效且安全的的抗肝癌疗法。方法：1、MTT法检测不同浓度梯度vo

6、lasertib单药以及联合DDP对肝癌细胞增殖的影响。2、流式细胞仪检测分析volasertib单药及联合DDP对肝癌细胞周期分布以及凋亡情况的影响。3、荧光显微镜观察检测不同浓度volasertib对肝癌细胞纺锤体形成的影响。4、移植瘤实验检测volasertib体内的抑瘤作用。5、Westernblot检测相关蛋白的表达水平变化，初步探讨其作用机制。结果：1、随着volasertib浓度的升高，对肝癌细胞增殖抑制作用增强，在BEL7402和HepG2中，volasertib的IC50值分别是0

7、.006±0.002μM和2.854±1.444μΜ；DDP的IC50值分别是8.6±3.503μΜ和6.947±1.742μΜ。在BEL7402中，10nMvolasertib联合10μΜDDP的联合作用指数CI值为0.71，具有中度协同作用；在HepG2中，3μΜvolasertib联合10μΜDDP的联合作用指数为0.76，具有中度协同作用。I暨南大学硕士学位论文2、随着浓度的增加，volasertib能够将BEL7402和HepG2细胞周期阻滞于G2/M期，进而诱导凋亡。不同浓度的联合作用组

8、凋亡率明显上升，对照组与单药组之间有统计学差异。3、Volasertib能够诱发BEL7402和HepG2细胞纺锤体形成异常。4、Westernblot显示，PARP剪切片段、CyclinB1和PLK1表达量增加，Wee1表达量减少，并呈现时间与剂量依赖性。5、15mg/kgvolasertib能够抑制BEL7402以及HepG2移植瘤的生长。结论：PLK1抑制剂volasertib能够在体内外抑制肝癌的生长增殖，volasertib联合DDP对肝癌细胞BEL7402