顺铂、环丙沙星及二者联合对人肝癌bel-7402细胞抑制作用体外实验研究

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1、新乡医学院硕士学位论文顺铂、环丙沙星及二者联合对人肝癌BEL--7402细胞抑制作用体外实验研究姓名：李冬扬申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：李韶山201204新乡医学院硕士学位论文顺铂、环丙沙星及二者联合对人肝癌BEL一7402细胞抑制作用体外实验研究摘要目的用临床上常用的抗肿瘤药物顺铂(cisplatin，DDP)，喹诺酮类抗菌药物环丙沙星(cipronoxacin，CIP)及二者联合作用于人肝癌BEL一7402细胞，观察其细胞增殖、损伤修复及迁移的变化，并从分子水平研究DDP、CIP对人肝癌BEL．7402细胞侵袭迁移重要

2、基因MMP的影响，探讨DDP、CIP可能的分子机制，从而为临床进一步应用此药物治疗肝癌提供依据。方法体外培养BEL．7402细胞，将细胞分成4组，分别为空白对照组、DDP组、CIP组、DDP联合CIP组。采用对数生长期的细胞进行实验。以四氮唑盐还原法(MTT法)测定生长抑制率，计算半数抑制浓度(妈D)；细胞划痕实验观察药物对肝癌细胞损伤修复能力影响，计算移行愈合率；细胞迁移实验观察药物对肝癌细胞迁移作用，计算其迁移抑制率；应用RT．PCR检测药物作用肝癌细胞后MMP．2、MMP．9基因转录水平的变化。结果1．不同浓度的DDP、CIP单

3、用及二者联合均能抑制BEL．7402细胞的生长，且抑制作用随药物浓度增加而增强，差异有显著性(P<0．01)；DDP的JGD为11．2±0．6umol／L，CIP的IC50为202．3±4．3¨m01／L，DDP联合CIP的』Go区问为9+60～12+250pm01／L；各浓度联合组与相应浓度DDP或CIP单药组相比，抑制率均有显著性差异(尸<0．01)；联合组疗效均优于单药组，在一定浓度范围内联合用药表现为相加作用。2．DDP、CIP单用及联合都对BEL一7402细胞的迁移愈合能力表现出一定的抑制作用，效果随着药物浓度的增加而加强，

4、药物组的细胞移行愈合率与对照组相比，除DDP组6um01／L，扮0．05，无显著性差异，其余药物组差异有统计学意义(尸

5、结果显示DDP、CIP单用或联合处理后BEL．7402细胞的MMP。2、MMP．9转录受到显著抑制(P

6、质金属蛋白酶新皇堕堂堕堡主堂垡堡塞—————————————————————————————————一InvitroStudyofCisplatinandCipronoxacinandCombinationInhibitinghumanhepatomaceUBEL·7402AbStractobjectiveToobseⅣechangesofproliferationandhealingaIldm1铲ationtreatedCisplatin(DDP)，oneofthemostcommonantitumordmgsusedmc11mc，

7、orCipronoxacin(CIP)，oneofQuinoloneantibacterialdmgsusedinclinic，werechosedtoinvestigatetheircytotoxicef．fectsonhlmlaIlh印atomacell1ineofBEL-7402inVitro·Andtheeffectoftheircolalitiononthekeygeneofmi铲ation，MMPsandpossiblemolecularmechanismwereevaluatedtosettlefoundationfor

8、usingthosetocure11Ver—cancer1nChnlC．MethodsBEL．7402cellswereculturedinVitroanddiVidedintofourgroups：control，Ci