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1、第25卷第1期中国矫形外科杂志Vol.25,No.12017年1月OrthopedicJournalofChinaJan.2017·基础研究·CDK抑制剂NSC649890联合顺铂对人骨肉瘤细胞U2-OS的抑制作用△詹平,于小龙,张斌,周鑫,付长林,聂涛,黄山虎,戴闽*(南昌大学第一附属医院骨科,南昌330006)摘要:[目的]探讨CDK抑制剂NSC649890联合顺铂对人骨肉瘤U2-OS细胞抑制作用及可能的机制。[方法]MTT法检测分别采用50、100、200、400、800nmol/L的NSC6498902、4
2、、6、8、10μg/ml顺铂、50nmol的NSC649890联合2μg/ml顺铂、300nmol的NSC649890联合6μg/ml顺铂培养48h后细胞增殖情况,金氏q值评价联合用药效应;流式细胞仪、Westernblotting检测分别采用300nmol/L的NSC649890、6μg/ml顺铂及二者联合培养48h后细胞凋亡及凋亡通路相关蛋白表达情况,以上实验均以单纯U2-OS细胞作为对照组。[结果]U2-OS细胞经不同浓度顺铂、NSC649890单独处理48h后,细胞抑制率随两种药物浓度增加而显著升高,比较差
3、异均有统计学意义(P<0.05)。在联合用药组中,顺铂与NSC649890联合浓度(2μg/ml+50nmol/L)组两药为协同作用,(6μg/ml+300nmol/L)组两药为相加作用。流式细胞仪检测显示,顺铂组、NSC649890组及联合组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。Westernblotting检测结果显示,与对照组相比,顺铂和NSC649890单独作用后均可下调Bcl-2蛋白、procaspase-3蛋白的表达水平及上调Bax蛋白的表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05),而两者联合作用时
4、效果更加显著(P<0.05)。[结论]NSC649890能增强顺铂对人骨肉瘤U2-OS细胞的抑制作用。关键词:人骨肉瘤U2-OS细胞,CDK抑制剂,顺铂,细胞增殖,细胞凋亡中图分类号:R738.1文献标志码:A文章编号:1005-8478(2017)01-0073-06CDKinhibitorNSC649890combinedwithorwithoutcisplatintoinhibithumanosteosarcomaU2-OScell.Anexperimentalstudy//ZHANPing,YUXiao-l
5、ong,ZHANGBin,etal.DepartmentofOrthopedics,TheFirstAffiliatedHospitalofNanchangUniversity,Nanchang330006,ChinaAbstract:[Objective]ToinvestigatetheeffectofCDKinhibitorNSC649890combinedwithcisplatinonhumanosteo⁃sarcomacelllineU2-OSanditspossiblemechanism.[Methods
6、]ThecytostaticeffectofNSC649890(50,100,200,400,and800nmol/L),cisplatin(2,4,6,8,and10μg/ml),andNSC649890combinedwithcisplatin(50nmol+2μg/ml,300nmol+6μg/ml)onU2-OScellswereevaluatedbyMTTassayat48hoursafterculture.Thedrugcombinationeffectwasevalu⁃atedusingJin’sQf
7、ormula.TheinfluenceofNSC649890(300nmol/L),cisplatin(6μg/ml),andNSC649890(300nmol/L)combinedwithcisplatin(6μg/ml)ontheapoptosisofU2-OScellsweredeterminedbyflowcytometryat48hoursafterculture.Theexpressionofapoptosissignalingpathway-relatedproteinsinU2-OScellstre
8、atedwithNSC649890(300nmol/L),cisplatin(6μg/ml),andNSC649890(300nmol/L)combinedwithcisplatin(6μg/ml)weremeasuredbyWesternblottingat48hoursafterculture.TheuntreatedU2-OScellswereinvo