opcml在胃癌中的表达及对胃癌细胞生物学的作用

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1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：OPCML在胃癌中的表达及对胃癌细胞生物学的作用TheExpressionofOPCMLinGastricCancerandRoleofOPCMLinBiologicalFunctionofGastricCancerCell作者姓名：李明指导教师姓名：马三梅及学位、职称：博士副教授学科、专业名称：生物化学与分子生物学学位类型：学术学位论文提交日期：论文答辩日期：答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：本人声明所圼交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研

2、究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得E南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料*与我一同工作的同志对本研究&做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢窓。学位论文作者签名:签字曰期：年/月>>学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定•有权保留并向国家有关部门或机构这交论文的复印件和磁湓，允许论文被杳阅和借阅。本人授权暨南大学4以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，吋以采用影印、缩印

3、或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用木授权书》学位论文作者签名：导师签名：签字曰期：年<月>#□签字日期：年<月%学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：通讯地址：邮編：暨南大学硕士学位论文摘要研究背景及目的：胃癌是一种有着很高死亡率和发病率的癌症。寻找分子标志物对胃癌的诊断及预后有着非常重要的意义。OPCML（Opioid-bindingprotein/celladhesionmolecule-like），为鸦片受体类的细胞黏附因子，一种抑癌基因，主要定位于人类染色体11q25。目

4、前，OPCML在胃癌中表达的研究较少，本研究旨在检测人胃癌组织中OPCML基因的表达及临床意义，并分析其过表达后对胃癌细胞株AGS增殖、克隆形成和迁移能力的影响，探讨OPCML基因在胃癌发生和发展过程中的可能作用机制。方法：（1）采用免疫组织化学技术检测OPCML蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达，并分析其与胃癌临床病理学特征和预后的关系。（2）RT-PCR法检测OPCML在人胃癌细胞株（7901、AGS、BGC823、MKN28、N87、KATO、SNU1）及正常胃粘膜组织中基因的扩增情况。（3）构建表达载体p

5、cDNA3.1-OPCML，以pcDNA3.1-Vector作为对照组，转染至胃癌细胞株AGS中，RT-PCR和Western分别检测转染后OPCMLmRNA和蛋白的表达水平。（4）通过CCK8法、平板克隆形成实验、软琼脂实验和划痕实验，分析OPCML表达上调后，对胃癌细胞株AGS增殖、克隆形成和迁移能力等生物学作用的影响。结果：（1）OPCML在胃癌组织中呈现低表达，占68.6%（81/118）；在118例胃癌组织中OPCML表达与胃癌浸润深度和分化程度有显著相关性（P＜0.05）；胃癌患者预后和OPCML的

6、表达、胃癌浸润深度、淋巴结转移和远处转移密切相关（P＜0.05）。（2）OPCML在胃癌细胞的mRNA表达水平显著低于正常胃粘膜组织。（3）RT-PCR、Western分别显示pcDNA3.1-OPCML转染后AGS细胞株中OPCMLmRNA和蛋白表达水平明显升高。（4）CCK8实验结果显示AGS细胞转染OPCML基因后，增殖能力显著下降。（5）平板克隆形成实验显示OPCML过表达抑制AGS细胞克隆（数量、体积）的形成。转染组和对照组形成的克隆数分别为（8.33±5.29）和（29.87±10.82），平均克隆

7、形成率相差72﹪。（6）软琼脂实验转染组和对照组形成克隆数分别为（23.33±6.66）和（69.67±10.50），相对克隆形成率差异为67﹪，两者具有统计学差异（P<0.05）。（7）划痕实验0h、24h、48h结果显示，相比于对照组，转染组细胞迁移距离较小，I暨南大学硕士学位论文划痕宽度明显较大结论：（1）OPCML在人胃癌组织及胃癌细胞株中低表达或者表达缺失；OPCML在胃癌中的表达与胃壁浸润深度和分化程度显著相关；OPCML表达与胃癌患者预后相关。（2）OPCML对胃癌细胞的增殖和迁移等生物学行为有显

8、著抑制作用。关键词：胃癌；OPCML；表达；生物学行为II暨南大学硕士学位论文AbstractObjective：Gastriccancerwasakindofveryhighmortalityandmorbiditycancer,lookingformolecularmarkershasveryimportantsignificanceforthediagnosisandprogno